Asid nikleik divize an asid dezoksiribonukleik (DNA) ak asid ribonukleik (RNA), pami ki RNA ka divize an RNA ribozomal (rRNA), RNA mesaje (mRNA) ak RNA transfè (tRNA) selon fonksyon diferan.

ADN se sitou konsantre nan nwayo a, mitokondri ak klowoplas, pandan y ap RNA sitou distribye nan sitoplasm la.

Paske baz purin ak baz pirimidin gen lyezon doub konjige nan asid nikleyik, asid nikleyik gen karakteristik absòpsyon iltravyolèt. Absòpsyon iltravyolèt nan sèl sodyòm ADN se alantou 260nm, epi absòpsyon li yo eksprime kòm A260, epi li se nan depresyon an absòpsyon nan 230nm, kidonk yo ka itilize espektroskopi iltravyolèt. Asid nikleik yo detèmine kantite ak kalitatif pa yon luminomètr.

Asid nikleik yo se anfolit, ki ekivalan a poliasid. Asid nikleik yo ka disosye nan anyon lè l sèvi avèk tanpon net oswa alkalin, epi yo mete yo nan yon jaden elektrik pou avanse pou pi nan direksyon anod la. Sa a se prensip elektwoforèz.

Prensip ak kondisyon pou fè ekstraksyon asid nikleik ak pirifikasyon

1. Asire entegrite estrikti prensipal asid nikleyik

2. Elimine kontaminasyon lòt molekil (tankou eksklizyon entèferans RNA lè èkstraksyon ADN)

3. Pa ta dwe gen okenn solvang òganik ak konsantrasyon segondè nan iyon metal ki anpeche anzim nan echantiyon asid nikleyik.

4. Diminye sibstans makromolekilè tankou pwoteyin, polisakarid ak lipid otank posib

Ekstraksyon asid nikleik ak metòd pou pirifye

1. Metòd ekstraksyon fenol / kloroform

Li te envante nan 1956. Apre yo fin trete selil la kase likid oswa tisi omojene ak fenol / klowofòm, eleman asid nikleyè yo, sitou ADN, yo fonn nan faz akeuz la, lipid yo sitou nan faz òganik la, ak pwoteyin yo sitiye ant de la. faz.

2. Alkòl presipitasyon

Etanòl ka elimine kouch idratasyon asid nikleyik epi ekspoze gwoup fosfat ki chaje negatif, ak iyon ki chaje pozitivman tankou NA﹢ ka konbine avèk gwoup fosfat pou fòme yon presipite.

3. Metòd kolòn chromatografik

Atravè materyèl adsorption espesyal ki baze sou silica a, ADN ka espesyalman adsorbed, pandan y ap RNA ak pwoteyin ka pase san pwoblèm, ak Lè sa a, sèvi ak sèl segondè ak pH ba pou mare asid nikleyik, epi elite ak sèl ki ba ak pH segondè pou separe ak pirifye nikleyè. asid.

4. Metòd alkali krak tèmik

Ekstraksyon alkalin sitou itilize diferans topolojik ant plasmid sikilè kovalan fèmen ak lineyè chromatin pou separe yo. Anba kondisyon alkalin, pwoteyin denatire yo idrosolubl.

5. Metòd piroliz bouyi

Solisyon ADN an trete chalè pou pran avantaj de pwopriyete molekil ADN lineyè pou separe fragman ADN nan presipite ki fòme pa pwoteyin denatire ak debri selilè pa santrifujasyon.

6. Metòd nanomayetik pèl

Sèvi ak nanotechnologie pou amelyore ak modifye sifas nanopartikul superparamayetik, yo prepare pèl nano-mayetik oksid Silisyòm superparamayetik. Pèl mayetik yo ka espesyalman rekonèt ak efikasman mare nan molekil asid nikleyik sou yon koòdone mikwoskopik. Sèvi ak pwopriyete superparamayetik nan nanosfè silica, anba aksyon sèl Chaotropic (guanidine idroklorid, guanidine isothiocyanate, elatriye) ak yon jaden mayetik ekstèn, ADN ak RNA yo te izole nan san, tisi bèt, manje, mikwo-òganis patojèn ak lòt echantiyon.