Metòd depirifikasyon pwoteyin:

Metòd la nan pirifikasyon pwoteyin, separasyon ak pirifikasyon nan pwoteyin, se pwoteyin nan lage nan selil orijinal yo oswa tisi nan yon eta ki fonn epi li rete nan eta orijinal la natirèl san pèt nan aktivite byolojik. Pou rezon sa a, materyèl la ta dwe retire tisi bèt ak adipoz, materyèl grenn yo ta dwe menm dekale kontaminasyon rad la grenn nan sibstans tankou tanen, ak grenn lwil oliv ta dwe de preferans sèvi ak yon sòlvan òganik ki ba-bouyi.

1. Metòd pou pirifye pwoteyin, gwosè ak diferan metòd analiz separasyon: dyaliz ak ultrafiltrasyon sèvi ak pwoteyin sa yo pou pase nan nati molekil ki pa ka pase nan manbràn semi-pèmeyab; dansite gradyan santrifujasyon Bon jan kalite a ak dansite nan pwoteyin nan mwayen an pral gen yon pi gwo enpak sou patikil. Vitès rezoud se pi vit; filtraj jèl se yon kalite kwomatografi kolòn.

2. Separasyon diferans solubilite nan itilize: elektwo-presipitasyon paske chaj nèt la nan molekil pwoteyin se nan zewo pwen izoelektrik, diminye repouse elektwostatik ant molekil, fasil yo total, ak solubility minimòm; solisyon sèl yo itilize ak solisyon sèl Konsantrasyon an ogmante oswa diminye solubilite pwoteyin nan.

3. Se chaj la separe ak analize pa metòd diferan, sa ki prensipal yo enkli elektwoforèz ak chromatografi echanj iyon.

4. Metòd depirifikasyon pwoteyinAdsorption selektif ak separasyon pwoteyin itilize fòs absòpsyon patikil.

5. Kwomatografi afinite baze sou separasyon ligand yo. Karakteristik byolojik sa a pèmèt molekil pwoteyin yo mare espesyalman olye ke kovalans nan yon lòt molekil yo rele yon ligand.

6. Metòd pou pirifye pwoteyin: Metòd presipitasyon sòlvan òganik ba-tanperati: Sèvi ak solvang òganik ki melanje ak dlo, tankou metanol, etanòl, pou diminye solubility ak presipitasyon pifò pwoteyin. Metòd sa a pi wo pase rezolisyon an sale soti, men pwoteyin nan denatire plis Lè fasil, li ta dwe fè nan tanperati ki ba.

Ki jan yo pirifyepirifikasyon pwoteyin:

Ki jan yo pirifye pwoteyin, pwoteyin se yon molekil gwo, ak divès kalite gwosè molekilè nan albumin, gen kèk metòd ki pi senp pou separe pwoteyin ak ti materyèl molekil, epi tou separe melanj pwoteyin. Metòd prensipal yo pou separe pwoteyin nan diferan gwosè molekilè yo se dyaliz, ultrafiltrasyon, filtraj jèl, ak separasyon santrifujeur. Dyaliz ak ultrafiltrasyon yo souvan itilize nan metòd separasyon pwoteyin. Yo mete melanj dyaliz la pou separe nan yon sache dyaliz ki fèt ak yon manbràn semipermeable, ak Lè sa a, benyen nan solisyon an dyaliz pou separasyon. Ultrafiltrasyon se pwosesis pou pase dlo ak lòt molekil ti lè l sèvi avèk fòs santrifujeur oswa presyon nan yon manbràn semi-pèmeyab ak pwoteyin pyèj nan manbràn semi-pèmeyab. De metòd sa yo ka separe de makromolekil ki baze sou pwoteyin ak ti molekil inòganik ki baze sou sèl. Yo souvan sale soti, yo itilize ansanm ak metòd la dissolution sèl, oswa yo ka prezante yo retire de metòd sa yo apre yo fin sale soti lè l sèvi avèk solisyon sèl inòganik.

1. Ki jan yo pirifye pwoteyin pa metòd saling-out: baz la nan metòd sale-soti se ke solubility nan pwoteyin nan solisyon sèl dilye ap ogmante ak ogmantasyon nan konsantrasyon sèl, men lè konsantrasyon nan sèl ogmante nan yon sèten valè, la. aktivite dlo yo pral ogmante. Diminye, ki an vire ka lakòz kèk pwoteyin jenere chaj nan sifas la estrikti molekilè yo dwe piti piti netralize, ak manbràn nan idratasyon piti piti detwi, sa ki ka evantyèlman lakòz pwoteyin ki gen rapò ak molekil yo devlope aglomerasyon ak presipite soti nan solisyon diferan.

2. Metòd presipitasyon sòlvan òganik: Gen de rezon ki fè diminye solubility nan pwoteyin nan solvang òganik: ki jan yo pirifye pwoteyin kòm yon solisyon sèl ak dezidratasyon; Dezyèmman, konstan dyelèktrik nan Solvang òganik pase dlo ka redwi Nan Solvang polè.

3. Pwoteyin presipitasyon ajan: pwoteyin kòm yon ajan presipitasyon sèlman aji sou yon sèl kalite oswa youn nan presipitasyon pwoteyin, sa ki komen yo se alkalin, pwoteyin, lectin, ak metal lou.

4. Polyethylene glycol presipitasyon: Ki jan yo pirifye dlo-idrosolubl polymère ki pa iyonik poupirifikasyon pwoteyin, tankou polyethylene glycol ak sodyòm dextran silfat pou presipite pwoteyin.