Koja je metoda pročišćavanja sustava za pročišćavanje proteina

Koja je metoda pročišćavanjasustav za pročišćavanje proteina? Potrebno je znati kodirajuću sekvencu DNA pročišćenog proteina, vidjeti koje su stanice ili tkiva prekomjerno eksprimirane u ciljnom genu i dizajnirati genske početnice za pojačanje arf ciljnog fragmenta DNA. To je takozvano stjecanje fragmenata ciljnog gena.

Konstrukcija ekspresijskog vektora: U prokariotskom ili eukariotskom ekspresijskom vektoru sa karakteristikama same dobivene ekspresije gena, glavni problem ovog koraka je konstruirati plazmid i gen od interesa, te ekspresijski sustav. Vrijeme ekspresije prokariota je kratko, cijena je niska, a velika količina ekspresije je prioritet; gen nije izražen u E. coli, a problem se javlja u optimizaciji kodona. S obzirom na bolju aktivnost i pročišćavanje proteina, istraživači su odabrali ekspresiju u Pichi kvascu. Uspješna ekspresija optimizacije kodona je važna.

19

Koja je metoda pročišćavanja sustava za pročišćavanje proteina:

1. Oborine.

2. Elektroforeza: Nabijeni protein je viši ili niži od svoje izoelektrične točke i može se premjestiti na negativnu elektrodu ili pozitivnu elektrodu električnog polja u električnom polju. Podržava filmsku elektroforezu, elektroforezu itd.

3. Dijaliza: Metoda koja koristi dvije dijalizne vrećice za odvajanje velikih molekula od proteina i malih molekularnih organskih spojeva.

4. Kromatografija: kromatografija ionske izmjene koristi slobodna svojstva proteina. Pod određenim pH, naboji i svojstva proteina su različiti, a mogu se razdvojiti kromatografijom ionske izmjene. U kromatografiji anionske izmjene prvo se eluiraju proteini niske negativne moći. Molekularna sita, također poznata kao gel filtracija. Sitni proteini ulaze u pore i ostaju u njima dugo vremena. Veliki proteini ne mogu ući u pore i izravno istjecati.

5. Koja je metoda pročišćavanjasustav za pročišćavanje proteina? Ultracentrifugiranje: pročišćavanje proteina može se koristiti za određivanje molekularne težine i može se koristiti kao protein. Odvaja se stvaranje proteina različite gustoće.


Vrijeme objave: 21. travnja 2021