Odvajanje i pročišćavanje proteina naširoko se koristi u biokemijskim istraživanjima i primjenama te je važna operativna vještina. Tvrtka SCG Protein Purification System-Saipu Instrument sastavila je sadržaj sirove separacije i fine separacijeproteinpročišćenje za sve. Tipična eukariotska stanica može sadržavati tisuće različitih proteina, neki su vrlo bogati, a neki sadrže samo nekoliko kopija. Da bi se proučavao određeni protein, potrebno je prvo pročistiti protein od drugih proteina i neproteinskih molekula.

Grubo odvajanje

Kada se dobije proteinski ekstrakt (ponekad pomiješan s nukleinskim kiselinama, polisaharidima itd.), odabire se niz odgovarajućih metoda za odvajanje željenogproteinod ostalih nečistoća. Općenito, ovaj korak odvajanja koristi metode kao što su isoljavanje, nakupljanje izoelektrične točke i frakcioniranje organskog otapala. Ove metode karakterizira jednostavnost i veliki kapacitet obrade, koji može ukloniti mnoge nečistoće i koncentrirati otopinu proteina. Neki proteinski ekstrakti su velikog volumena i nisu prikladni za koncentraciju nakupljanjem ili soljenjem. Možete odabrati ultrafiltraciju, gel filtraciju, vakuumsko sušenje smrzavanjem ili druge metode koncentriranja.

Fino odvajanje

Nakon grubog frakcioniranja uzorka, volumen je općenito mali, a većina nečistoća je uklonjena. Za daljnje pročišćavanje, metode kromatografije općenito uključuju gel filtraciju, kromatografiju ionske izmjene, adsorpcijsku kromatografiju i afinitetnu kromatografiju. Ako je potrebno, također možete odabrati elektroforezu, uključujući zonsku elektroforezu, postavljanje izoelektričnih točaka itd. kao završni postupak pročišćavanja. Metoda koja se koristi za odvajanje razine potpodjele općenito je mala u planiranju, ali s visokom rezolucijom.

Kristalizacija je konačni proces odvajanja i pročišćavanja proteina. Iako proces kristalizacije ne osigurava da protein mora biti ujednačen, samo kada određeni protein ima prednost u otopini može nastati kristal. Sam proces kristalizacije prati određeni stupanj pročišćavanja, a rekristalizacijom se može ukloniti mala količina krivotvorenog proteina. Budući da je denaturiranproteinnikada nije pronađen tijekom procesa kristalizacije, kristalizacija proteina nije samo znak čistoće, već i snažna smjernica za utvrđivanje je li proizvod u svom prirodnom stanju.