Metode odpročišćavanje proteina:

Metoda pročišćavanja proteina, odvajanje i pročišćavanje proteina, protein se oslobađa iz izvornih stanica ili tkiva u otopljenom stanju i ostaje u izvornom prirodnom stanju bez gubitka biološke aktivnosti. Iz tog razloga, materijal treba ukloniti životinjsko i masno tkivo, sjemenski materijal treba čak i oljuštiti onečišćenje ovojnice sjemena od tvari kao što su tanini, a sjemenke uljarica treba po mogućnosti koristiti organsko otapalo niskog vrelišta.

1. Metoda pročišćavanja proteina, veličina i različite metode analize odvajanja: dijaliza i ultrafiltracija koriste ove proteine ​​za prolaz kroz prirodu molekula koje ne mogu proći kroz polupropusnu membranu; centrifugiranje s gradijentom gustoće Kvaliteta i gustoća proteina u mediju imat će veći utjecaj na čestice. Brzina taloženja je brža; gel filtracija je vrsta kolonske kromatografije.

2. Odvajanje razlike u topljivosti u upotrebi: elektrotaloženje jer je neto naboj proteinskih molekula na nultoj izoelektričnoj točki, smanjuje elektrostatsko odbijanje između molekula, lako se agregira i minimalna je topljivost; otopina soli koja se koristi s otopinom soli Koncentracija povećava ili smanjuje topljivost proteina.

3. Naboj se odvaja i analizira različitim metodama, glavni sadržaji uključuju elektroforezu i kromatografiju ionske izmjene.

4. Metode odpročišćavanje proteinaSelektivna adsorpcija i odvajanje proteina koristi snagu adsorpcije čestica.

5. Afinitetna kromatografija temelji se na odvajanju liganada. Ova biološka karakteristika omogućuje proteinskim molekulama da se vežu specifično, a ne kovalentno, na drugu molekulu koja se naziva ligand.

6. Metoda pročišćavanja proteina: Metoda taloženja organskim otapalom na niskoj temperaturi: Koristite organska otapala koja se miješaju s vodom, kao što su metanol, etanol, kako biste smanjili topljivost i taloženje većine proteina. Ova metoda je veća od razlučivosti soljenja, ali protein više denaturira. Kada je laka, treba je izvesti na niskoj temperaturi.

Kako pročistitipročišćavanje proteina:

Kako pročistiti protein, protein je velika molekula, i različite veličine molekula albumina, postoje neke jednostavnije metode za odvajanje proteina i materijala malih molekula, kao i odvojene proteinske smjese. Glavne metode za odvajanje proteina različitih veličina molekula su dijaliza, ultrafiltracija, gel filtracija i centrifugalna separacija. Dijaliza i ultrafiltracija se obično koriste u metodama razdvajanja proteina. Dijalizna smjesa koju treba odvojiti stavlja se u dijaliznu vrećicu izrađenu od polupropusne membrane, a zatim se uranja u dijaliznu otopinu radi razdvajanja. Ultrafiltracija je proces propuštanja vode i drugih malih molekula pomoću centrifugalne sile ili tlaka u polupropusnoj membrani i hvatanja proteina u polupropusnoj membrani. Ove dvije metode mogu se odvojiti od makromolekula na bazi proteina i malih molekula na bazi anorganske soli. Često se isoljavaju, koriste zajedno s metodom otapanja soli ili se mogu uvesti za uklanjanje ovih dviju metoda nakon soljenja pomoću otopina anorganske soli.

1. Kako pročistiti protein metodom soljenja: Osnova metode soljenja je da će se topljivost proteina u razrijeđenoj otopini soli povećavati s povećanjem koncentracije soli, ali kada se koncentracija soli poveća na određenu vrijednost, aktivnost vode će se povećati. Smanjenje, što zauzvrat može uzrokovati da neki proteini generiraju naboje kroz površinu molekularne strukture koja se postupno neutralizira, a hidratacijska membrana se postupno uništava, što na kraju može uzrokovati aglomeraciju i taloženje povezanih proteina i molekula iz različitih otopina.

2. Metoda taloženja organskim otapalom: Postoje dva razloga za smanjenje topljivosti proteina u organskim otapalima: kako pročistiti protein kao otopinu soli s dehidracijom; drugo, dielektrična konstanta organskih otapala od vode može se smanjiti u polarnim otapalima.

3. Sredstvo za taloženje proteina: protein kao sredstvo za taloženje djeluje samo na jednu vrstu taloženja proteina, uobičajeni su alkalni, proteinski, lektinski i teški metali.

4. Taloženje polietilen glikola: Kako pročistiti neionske polimere topive u vodi zapročišćavanje proteina, kao što su polietilen glikol i natrijev dekstran sulfat za taloženje proteina.