प्रोटीन का पृथक्करण और शुद्धिकरण जैव रसायन अनुसंधान और अनुप्रयोग में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है और यह एक महत्वपूर्ण परिचालन कौशल है। एससीजी प्रोटीन शुद्धिकरण प्रणाली कंपनी-साइपू इंस्ट्रूमेंट ने कच्चे तेल के पृथक्करण और बारीक पृथक्करण सामग्री को संकलित किया हैप्रोटीनसभी के लिए शुद्धि. एक विशिष्ट यूकेरियोटिक कोशिका में हजारों विभिन्न प्रोटीन हो सकते हैं, कुछ बहुत समृद्ध होते हैं और कुछ में केवल कुछ प्रतियां होती हैं। एक निश्चित प्रोटीन का अध्ययन करने के लिए, पहले प्रोटीन को अन्य प्रोटीन और गैर-प्रोटीन अणुओं से शुद्ध करना आवश्यक है।

स्थूल अलगाव

जब प्रोटीन अर्क (कभी-कभी न्यूक्लिक एसिड, पॉलीसेकेराइड, आदि के साथ मिलाया जाता है) प्राप्त होता है, तो वांछित को अलग करने के लिए उपयुक्त तरीकों का एक सेट चुना जाता है।प्रोटीनअन्य अशुद्धियों से. आम तौर पर, पृथक्करण के इस चरण में सॉल्टिंग आउट, आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट संचय और कार्बनिक विलायक अंशीकरण जैसी विधियों का उपयोग किया जाता है। इन विधियों की विशेषता सरलता और बड़ी प्रसंस्करण क्षमता है, जो कई अशुद्धियों को दूर कर सकती है और प्रोटीन समाधान को केंद्रित कर सकती है। कुछ प्रोटीन अर्क मात्रा में बड़े होते हैं और संचयन या लवणीकरण द्वारा एकाग्रता के लिए उपयुक्त नहीं होते हैं। आप एकाग्रता के लिए अल्ट्राफिल्ट्रेशन, जेल फिल्टरेशन, फ्रीजिंग वैक्यूम सुखाने या अन्य तरीकों का चयन कर सकते हैं।

बढ़िया अलगाव

नमूने के मोटे अंशीकरण के बाद, मात्रा आम तौर पर छोटी होती है, और अधिकांश अशुद्धियाँ हटा दी जाती हैं। आगे शुद्धिकरण के लिए, क्रोमैटोग्राफी विधियों में आम तौर पर जेल निस्पंदन, आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी, सोखना क्रोमैटोग्राफी और आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी शामिल हैं। यदि आवश्यक हो, तो आप अंतिम शुद्धिकरण प्रक्रिया के रूप में ज़ोन इलेक्ट्रोफोरेसिस, आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट सेट आदि सहित इलेक्ट्रोफोरेसिस भी चुन सकते हैं। उपखंड स्तर के पृथक्करण के लिए उपयोग की जाने वाली विधि आम तौर पर योजना में छोटी होती है, लेकिन उच्च रिज़ॉल्यूशन वाली होती है।

क्रिस्टलीकरण प्रोटीन पृथक्करण और शुद्धिकरण की अंतिम प्रक्रिया है। यद्यपि क्रिस्टलीकरण प्रक्रिया यह सुनिश्चित नहीं करती है कि प्रोटीन एक समान होना चाहिए, यह केवल तभी होता है जब एक निश्चित प्रोटीन को क्रिस्टल बनाने के लिए समाधान में लाभ होता है। क्रिस्टलीकरण प्रक्रिया स्वयं कुछ हद तक शुद्धिकरण के साथ होती है, और पुन: क्रिस्टलीकरण से मिलावटी प्रोटीन की थोड़ी मात्रा को हटाया जा सकता है। विकृत होने के बाद सेप्रोटीनक्रिस्टलीकरण प्रक्रिया के दौरान कभी नहीं पाया गया है, प्रोटीन क्रिस्टलीकरण न केवल शुद्धता का संकेत है, बल्कि यह निर्धारित करने के लिए एक शक्तिशाली दिशानिर्देश भी है कि उत्पाद अपनी प्राकृतिक अवस्था में है।