He aha ke ʻano hoʻomaʻemaʻe o kaʻōnaehana hoʻomaʻemaʻe protein? Pono e ʻike i ke kaʻina DNA coding o ka protein i hoʻomaʻemaʻe ʻia, e ʻike i ke ʻano o nā cell a i ʻole nāʻiʻo i hōʻike nui ʻia i loko o ka gene i manaʻo ʻia, a me ka hoʻolālā ʻana i nā gene primers e hoʻonui i ka arf o ka ʻāpana DNA i manaʻo ʻia. ʻO kēia ka mea i kapa ʻia ka loaʻa ʻana o nā ʻāpana gene target.

Ke kūkulu 'ana o ka'ōlelo vector: I ka prokaryotic a eukaryotic hōʻike vector me nā hiʻohiʻona o ka loaʻa gene hoike ia iho, ka pilikia nui o keia kaʻina mea e kūkulu i ka plasmid a me ka gene o ka hoihoi, a me ka'ōnaehana hōʻike. He pōkole ka manawa hōʻike prokaryotic, haʻahaʻa ke kumukūʻai, a ʻo ka nui o ka hōʻike he mea nui ia; ʻAʻole i hōʻike ʻia ka gene ma E. coli, a loaʻa ka pilikia i ka codon optimization. I ka noʻonoʻo ʻana i ka hana ʻoi aku ka maikaʻi a me ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i ka protein, ua koho nā mea noiʻi e hōʻike i ka hū Pichi. He mea koʻikoʻi ka hōʻike kūleʻa o ka codon optimization.

He aha ke ʻano hoʻomaʻemaʻe o ka ʻōnaehana hoʻomaʻemaʻe protein:

1. Ka ua.

2. Electrophoresis: ʻOi aku ka kiʻekiʻe a i ʻole ka haʻahaʻa o ka protein i hoʻopaʻa ʻia ma mua o kona wahi isoelectric a hiki ke hoʻoneʻe ʻia i ka electrode maikaʻi ʻole a i ʻole ka electrode maikaʻi o ke kahua uila ma ke kahua uila. Kākoʻo kiʻiʻoniʻoni electrophoresis, electrophoresis, etc.

3. Dialysis: He ʻano hana e hoʻohana ana i ʻelua ʻeke dialysis e hoʻokaʻawale i nā molekala nui mai nā protein a me nā pūhui ʻano liʻiliʻi.

4. Chromatography: Hoʻohana ka chromatography hoʻololi Ion i nā waiwai manuahi o nā protein. Ma lalo o kahi pH kikoʻī, ʻokoʻa nā uku a me nā waiwai o nā protein, a hiki ke hoʻokaʻawale ʻia lākou e ka chromatography hoʻololi ion. I ka chromatography hoʻololi anion, hoʻokaʻawale mua ʻia nā protein me ka mana maikaʻi ʻole. Nā kānana molekula, i ʻike pū ʻia me ka kānana gel. Hoʻokomo nā protein liʻiliʻi i nā pores a noho i loko o lākou no ka manawa lōʻihi. ʻAʻole hiki i nā protein nui ke komo i nā pores a kahe pololei.

5. Heaha ke ano hoomaemae o kaʻōnaehana hoʻomaʻemaʻe protein? Ultracentrifugation: Hiki ke hoʻohana ʻia ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i ka protein no ka hoʻoholo ʻana i ke kaumaha molekala a hiki ke hoʻohana ʻia e like me ka protein. Hoʻokaʻawale ʻia ka hana ʻana o nā protein me nā ʻano like ʻole.