Ua puni ʻo SPE no nā makahiki he nui, a no ke kumu maikaʻi. Ke makemake nei nā ʻepekema e wehe i nā ʻāpana hope mai kā lākou mau laʻana, ke alo nei lākou i ka paʻakikī o ka hana ʻana me ka ʻole o ka hōʻemi ʻana i ko lākou hiki ke hoʻoholo pololei a pololei i ka hele ʻana a me ka nui o kā lākou pūhui hoihoi. ʻO SPE kekahi ʻenehana i hoʻohana pinepine ʻia e ka poʻe ʻepekema e kōkua i ka hoʻomākaukau ʻana i kā lākou mau laʻana no ka mea kani koʻikoʻi i hoʻohana ʻia no ka loiloi quantitative. Paʻa ʻo SPE, hana no nā ʻano laʻana like ʻole, a ke hoʻomau ʻia nei nā huahana SPE hou a me nā ʻano hana. ʻO ka naʻau o ka hoʻomohala ʻana i kēlā mau ʻano ka mahalo ʻoiai ʻaʻole ʻike ʻia ka huaʻōlelo "chromatography" ma ka inoa o ka ʻenehana, ʻo SPE naʻe he ʻano o ka hoʻokaʻawale chromatographic.

SPE: The Silent Chromatography

Aia kekahi ʻōlelo kahiko, “inā hāʻule ka lāʻau i loko o ka ululāʻau, a ʻaʻohe mea e lohe ai, kani mau nō ia?” Hoʻomanaʻo mai kēlā ʻōlelo iā SPE. He mea ʻē paha ka ʻōlelo ʻana, akā ke noʻonoʻo mākou iā SPE, lilo ka nīnau "inā he kaʻawale a ʻaʻohe mea ʻike ma laila e hoʻopaʻa ai, ua hana maoli anei ka chromatography?" Ma ka hihia o SPE, ʻo ka pane he "ʻae!" Ke hoʻomohala a hoʻoponopono paha i kahi ala SPE, hiki ke kōkua nui i ka hoʻomanaʻo ʻana he chromatography wale nō ka SPE me ka ʻole o ka chromatogram. Ke noʻonoʻo ʻoe, ʻaʻole anei ʻo Mikhail Tsvet, i ʻike ʻia ʻo "ka makua o ka chromatography," i hana i ka mea a mākou e kapa ai ʻo "SPE" i kēia lā? I kona hoʻokaʻawale ʻana i kāna hui ʻana o nā puaʻa mea kanu ma ka ʻae ʻana i ka ʻumekaumaha e lawe iā lākou, i hoʻoheheʻe ʻia i loko o kahi mea hoʻoheheʻe, ma o kahi moena o ka paʻakai lepo, ʻokoʻa anei ia ma mua o ke ʻano SPE hou?

Ka hoomaopopo ana i kou laana

No ka mea ua hoʻokumu ʻia ka SPE ma nā loina chromatographic, ma ka puʻuwai o kēlā me kēia ʻano SPE maikaʻi ka pilina ma waena o nā analytes, ka matrix, ka pae paʻa (ka SPE sorbent), a me ka pae kelepona (nā mea hoʻoheheʻe i hoʻohana ʻia e holoi a elute i ka hāpana) .

ʻO ka hoʻomaopopo ʻana i ke ʻano o kāu laʻana e like me ka hiki ke wahi maikaʻi loa e hoʻomaka ai inā pono ʻoe e hoʻomohala a hoʻoponopono paha i kahi ala SPE. No ka pale ʻana i ka hoʻāʻo a me ka hewa ʻole i ka wā o ka hoʻomohala ʻana i ke ʻano, kōkua nui ka wehewehe ʻana i nā waiwai kino a me nā mea kemika o kāu mau analytes a me ka matrix. Ke ʻike ʻoe e pili ana i kāu laʻana, e ʻoi aku ʻoe i kahi kūlana maikaʻi e hoʻohālikelike i kēlā hāpana me kahi huahana SPE kūpono. No ka laʻana, ʻo ka ʻike ʻana i ka polarity pili o nā analytes i hoʻohālikelike ʻia i kekahi i kekahi a hiki i ka matrix ke kōkua iā ʻoe e hoʻoholo inā hoʻohana ka polarity e hoʻokaʻawale i nā analytes mai ka matrix ke ala kūpono. ʻO ka ʻike inā he kūʻokoʻa kāu analytes a i ʻole hiki ke noho ma nā mokuʻāina i hoʻopaʻa ʻia hiki ke kōkua iā ʻoe e kuhikuhi iā ʻoe i nā huahana SPE i loea i ka mālama ʻana a i ʻole eluting neutrals, hoʻopiʻi maikaʻi, a i ʻole nā ​​​​mea hoʻopiʻi ʻino. Hōʻike kēia mau manaʻo ʻelua i ʻelua o nā waiwai analyte i hoʻohana pinepine ʻia e leverage i ka wā e hoʻomohala ai i nā ala SPE a koho i nā huahana SPE. Inā hiki iā ʻoe ke wehewehe i kāu analytes a me nā ʻāpana matrix koʻikoʻi i kēia mau huaʻōlelo, ke hele nei ʻoe e koho i kahi ala maikaʻi no kāu hoʻomohala ʻana i ke ʻano SPE.

Hoʻokaʻawale ʻia e ka Affinity

ʻO nā loina e wehewehe ana i ka hoʻokaʻawale ʻana i loko o kahi kolamu LC, no ka laʻana, ke pāʻani nei i kahi kaʻawale SPE. ʻO ke kumu o ka hoʻokaʻawale chromatographic ke hoʻokumu nei i kahi ʻōnaehana like ʻole o ka launa pū ʻana ma waena o nā ʻāpana o ka hāpana a me nā ʻāpana ʻelua i loaʻa i ke kolamu a i ʻole ka pahu SPE, ka pae kelepona a me ka pae paʻa.

ʻO kekahi o nā ʻanuʻu mua i ka ʻoluʻolu me ka hoʻomohala ʻana i ke ʻano SPE, ʻo ia ka ʻike ʻana i nā ʻano pilina ʻelua i ʻike pinepine ʻia ma ka hoʻokaʻawale ʻana o SPE: polarity a/a i ʻole ka mokuʻāina uku.

Polarity

Inā ʻoe e hoʻohana i ka polarity e hoʻomaʻemaʻe i kāu laʻana, ʻo kekahi o nā koho mua āu e hana ai ʻo ka hoʻoholo ʻana i ke ʻano o ka "mode". ʻOi aku ka maikaʻi o ka hana ʻana me kahi ʻano polar SPE a me kahi ʻano kaʻahele nonpolar (ʻo ia hoʻi ke ʻano maʻamau) a i ʻole ka ʻaoʻao ʻē aʻe, kahi ʻano SPE ʻano nonpolar i hui pū ʻia me kahi ʻano polar mobile (ʻo ia hoʻi ke ʻano hoʻohuli, kapa ʻia no ka mea ʻo ia ka ʻaoʻao. o ka "mode maʻamau" i hoʻokumu mua ʻia).

Ke ʻimi nei ʻoe i nā huahana SPE, e ʻike ʻoe aia nā pae SPE i nā ʻano polarities. Eia kekahi, ʻo ke koho ʻana i ka solvent phase mobile e hāʻawi i kahi ākea o nā polarities, pinepine hiki ke hoʻohana ʻia ma o ka hoʻohana ʻana i nā hui o nā solvents, buffers, a i ʻole nā ​​​​mea hoʻohui ʻē aʻe. Loaʻa ka nui o ka finesse i ka wā e hoʻohana ai i nā ʻokoʻa polarity e like me ke ʻano koʻikoʻi e hoʻohana ai e hoʻokaʻawale i kāu mau analytes mai nā interferences matrix (a i ʻole kekahi i kekahi).

E hoʻomanaʻo wale i ka ʻōlelo kemika kahiko "like dissolves like" ke noʻonoʻo nei ʻoe i ka polarity ma ke ʻano he mea hoʻokele kaʻawale. ʻOi aku ka like o ka pūhui i ka polarity o kahi pae paʻa a paʻa paha, ʻoi aku ka ikaika o ka launa pū ʻana. ʻO ka hoʻopili ikaika ʻana me ka pae paʻa e alakaʻi i ka hoʻopaʻa ʻana i ka ʻoihana SPE. ʻO nā pilina ikaika me ka māhele paʻa e alakaʻi i ka liʻiliʻi o ka paʻa a me ka elution mua.

Mokuʻāina ʻauhau

Inā noho mau nā analytes o ka ukupanee i loko o kahi moku'āina i hoʻopiʻi ʻia a i ʻole hiki ke hoʻokomo ʻia i loko o kahi kūlana i hoʻopaʻa ʻia e nā kūlana o ka hopena i hoʻoheheʻe ʻia i loko (e like me ka pH), a laila kekahi ala ikaika e hoʻokaʻawale iā lākou mai ka matrix (a i kēlā me kēia. ʻē aʻe) ma o ka hoʻohana ʻana i ka media SPE hiki ke huki iā lākou me kā lākou uku ponoʻī.

I kēia hihia, pili nā lula hukihuki electrostatic maʻamau. ʻAʻole like me ka hoʻokaʻawale ʻana e hilinaʻi nei i nā hiʻohiʻona polarity a me ke ʻano hoʻohālike "like dissolves like" o ka launa pū ʻana, e hana ana nā pilina mokuʻāina i hoʻopaʻa ʻia ma ke kānāwai o ka "hoʻokaʻawale ʻana i nā mea kū'ē." No ka laʻana, loaʻa paha iā ʻoe kahi media SPE i loaʻa ka uku maikaʻi ma kona ʻili. No ke kaulike ʻana i kēlā ʻili i hoʻopaʻi maikaʻi ʻia, aia kekahi ʻano i hoʻopaʻa ʻole ʻia (he anion) i hoʻopaʻa mua ʻia iā ia. Inā hoʻokomo ʻia kāu analyte i hoʻopiʻi maikaʻi ʻole ʻia i loko o ka ʻōnaehana, hiki iā ia ke hoʻoneʻe i ka anion i hoʻopaʻa mua ʻia a launa pū me ka ʻili SPE i hoʻopiʻi maikaʻi ʻia. Loaʻa kēia i ka paʻa ʻana o ka analyte ma ka pae SPE. Ua kapa ʻia kēia hoʻololi ʻana o nā anion "Anion Exchange" a he hoʻokahi wale nō hiʻohiʻona o ka māhele ākea o nā huahana SPE "Ion Exchange". Ma kēia laʻana, loaʻa i nā ʻano mea i hoʻopaʻi maikaʻi ʻia ka manaʻo ikaika e noho i ka pae paʻa a ʻaʻole e launa pū me ka ʻili SPE i hoʻopaʻa maikaʻi ʻia, no laila ʻaʻole lākou e paʻa. A, inā ʻaʻole i loaʻa nā ʻano ʻē aʻe o ka ʻili o SPE i ka hoʻohui ʻana i kāna mau waiwai hoʻololi ion, e mālama ʻia nā ʻano kūʻokoʻa (ʻoiai, aia nā huahana SPE i hui pū ʻia, e ʻae iā ʻoe e hoʻohana i ka hoʻololi ʻana i ka ion a me nā ʻano hana hoʻopaʻa ʻana i ke ʻano hoʻololi i ka ʻano SPE like. ).

ʻO kahi ʻokoʻa koʻikoʻi e hoʻomanaʻo ʻia i ka wā e hoʻohana ai i nā mīkini hoʻololi ion ke ʻano o ke kūlana hoʻopiʻi o ka analyte. Inā hoʻopiʻi mau ʻia ka analyte, me ka nānā ʻole i ka pH o ka hopena i loko, ua manaʻo ʻia he ʻano "ikaika". Inā hoʻopiʻi wale ʻia ka analyte ma lalo o kekahi mau kūlana pH, manaʻo ʻia he ʻano "nāwaliwali". He ʻano koʻikoʻi kēlā e hoʻomaopopo ai e pili ana i kāu mau analytes no ka mea e hoʻoholo ai i ke ʻano o ka media SPE e hoʻohana ai. Ma nā ʻōlelo maʻamau, ʻo ka noʻonoʻo ʻana e pili ana i nā mea kūʻē i ka hele pū ʻana e kōkua mai ʻaneʻi. Pono e hoʻohui i kahi mea hoʻololi ion hoʻololi SPE sorbent me kahi ʻano "ikaika" a me kahi sorbent hoʻololi ion ikaika me kahi analyte "nawaliwali".