ની શુદ્ધિકરણ પદ્ધતિ શું છેપ્રોટીન શુદ્ધિકરણ સિસ્ટમ? શુદ્ધ થયેલ પ્રોટીનના કોડિંગ ડીએનએ ક્રમને જાણવું જરૂરી છે, તે જોવા માટે કે કયા કોષો અથવા પેશીઓ લક્ષ્ય જનીનમાં વધુ પડતા પ્રભાવિત છે, અને લક્ષ્ય DNA ટુકડાના એઆરએફને વિસ્તૃત કરવા માટે જીન પ્રાઈમર ડિઝાઇન કરવા માટે. આ લક્ષ્ય જનીન ટુકડાઓનું કહેવાતું સંપાદન છે.

અભિવ્યક્તિ વેક્ટરનું નિર્માણ: પ્રાપ્ત જનીન અભિવ્યક્તિની લાક્ષણિકતાઓ સાથે પ્રોકાર્યોટિક અથવા યુકેરીયોટિક અભિવ્યક્તિ વેક્ટરમાં, આ પગલાની મુખ્ય સમસ્યા પ્લાઝમિડ અને રસના જનીન, અને અભિવ્યક્તિ સિસ્ટમનું નિર્માણ કરવાની છે. પ્રોકાર્યોટિક અભિવ્યક્તિનો સમય ઓછો છે, કિંમત ઓછી છે અને અભિવ્યક્તિની મોટી માત્રા પ્રાથમિકતા છે; જનીન E. coli માં વ્યક્ત થતું નથી, અને સમસ્યા કોડોન ઑપ્ટિમાઇઝેશનમાં થાય છે. પ્રોટીનની વધુ સારી પ્રવૃત્તિ અને શુદ્ધિકરણને ધ્યાનમાં રાખીને, સંશોધકોએ પિચી યીસ્ટમાં વ્યક્ત કરવાનું પસંદ કર્યું. કોડોન ઓપ્ટિમાઇઝેશનની સફળ અભિવ્યક્તિ મહત્વપૂર્ણ છે.

પ્રોટીન શુદ્ધિકરણ પ્રણાલીની શુદ્ધિકરણ પદ્ધતિ શું છે:

1. વરસાદ.

2. ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ: ચાર્જ થયેલ પ્રોટીન તેના આઇસોઇલેક્ટ્રિક બિંદુ કરતા વધારે અથવા નીચું હોય છે અને તેને ઇલેક્ટ્રિક ક્ષેત્રમાં નકારાત્મક ઇલેક્ટ્રોડ અથવા ઇલેક્ટ્રિક ક્ષેત્રના હકારાત્મક ઇલેક્ટ્રોડ પર ખસેડી શકાય છે. સપોર્ટ ફિલ્મ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ, ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ, વગેરે.

3. ડાયાલિસિસ: એક પદ્ધતિ જે પ્રોટીન અને નાના પરમાણુ કાર્બનિક સંયોજનોમાંથી મોટા અણુઓને અલગ કરવા માટે બે ડાયાલિસિસ બેગનો ઉપયોગ કરે છે.

4. ક્રોમેટોગ્રાફી: આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી પ્રોટીનના મુક્ત ગુણધર્મોનો ઉપયોગ કરે છે. ચોક્કસ pH હેઠળ, પ્રોટીનના ચાર્જ અને ગુણધર્મો અલગ હોય છે, અને તેમને આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી દ્વારા અલગ કરી શકાય છે. આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, ઓછી નકારાત્મક શક્તિવાળા પ્રોટીનને પ્રથમ દૂર કરવામાં આવે છે. મોલેક્યુલર સિવ્સ, જેને જેલ ફિલ્ટરેશન તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે. નાના પ્રોટીન છિદ્રોમાં પ્રવેશ કરે છે અને લાંબા સમય સુધી તેમાં રહે છે. મોટા પ્રોટીન છિદ્રોમાં પ્રવેશી શકતા નથી અને સીધા બહાર વહે છે.

5. શુદ્ધિકરણ પદ્ધતિ શું છેપ્રોટીન શુદ્ધિકરણ સિસ્ટમ? અલ્ટ્રાસેન્ટ્રીફ્યુગેશન: પ્રોટીન શુદ્ધિકરણનો ઉપયોગ મોલેક્યુલર વજન નક્કી કરવા માટે થઈ શકે છે અને તેનો ઉપયોગ પ્રોટીન તરીકે થઈ શકે છે. વિવિધ ઘનતાવાળા પ્રોટીનની રચનાને અલગ કરવામાં આવે છે.