પ્રોટીનનું વિભાજન અને શુદ્ધિકરણ બાયોકેમિસ્ટ્રી સંશોધન અને એપ્લિકેશનમાં વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે અને તે એક મહત્વપૂર્ણ ઓપરેશનલ કૌશલ્ય છે. SCG પ્રોટીન પ્યુરિફિકેશન સિસ્ટમ કંપની-સાઇપુ ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટે ક્રૂડ સેપરેશન અને ફાઇન સેપરેશન કન્ટેન્ટનું સંકલન કર્યું છે.પ્રોટીનદરેક માટે શુદ્ધિકરણ. એક સામાન્ય યુકેરીયોટિક કોષમાં હજારો વિવિધ પ્રોટીન હોઈ શકે છે, કેટલાક ખૂબ સમૃદ્ધ હોય છે અને કેટલાકમાં માત્ર થોડી નકલો હોય છે. ચોક્કસ પ્રોટીનનો અભ્યાસ કરવા માટે, પ્રથમ પ્રોટીનને અન્ય પ્રોટીન અને બિન-પ્રોટીન અણુઓમાંથી શુદ્ધ કરવું જરૂરી છે.

બરછટ અલગ

જ્યારે પ્રોટીન અર્ક (ક્યારેક ન્યુક્લીક એસિડ, પોલિસેકરાઇડ્સ વગેરે સાથે મિશ્રિત) મેળવવામાં આવે છે, ત્યારે ઇચ્છિતને અલગ કરવા માટે યોગ્ય પદ્ધતિઓનો સમૂહ પસંદ કરવામાં આવે છે.પ્રોટીનઅન્ય અશુદ્ધિઓમાંથી. સામાન્ય રીતે, વિભાજનનું આ પગલું સોલ્ટિંગ આઉટ, આઇસોઇલેક્ટ્રિક બિંદુ સંચય અને કાર્બનિક દ્રાવક અપૂર્ણાંક જેવી પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરે છે. આ પદ્ધતિઓ સરળતા અને મોટી પ્રોસેસિંગ ક્ષમતા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે, જે ઘણી અશુદ્ધિઓને દૂર કરી શકે છે અને પ્રોટીન સોલ્યુશનને કેન્દ્રિત કરી શકે છે. કેટલાક પ્રોટીન અર્ક જથ્થામાં મોટા હોય છે અને તે એકઠા કરીને અથવા મીઠું ચડાવીને એકાગ્રતા માટે યોગ્ય નથી. તમે અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન, જેલ ફિલ્ટરેશન, ફ્રીઝિંગ વેક્યુમ ડ્રાયિંગ અથવા એકાગ્રતા માટે અન્ય પદ્ધતિઓ પસંદ કરી શકો છો.

ફાઇન અલગ

નમૂનાના રફ ફ્રેક્શનેશન પછી, વોલ્યુમ સામાન્ય રીતે નાનું હોય છે, અને મોટાભાગની અશુદ્ધિઓ દૂર કરવામાં આવી છે. વધુ શુદ્ધિકરણ માટે, ક્રોમેટોગ્રાફી પદ્ધતિઓમાં સામાન્ય રીતે જેલ ફિલ્ટરેશન, આયન એક્સચેન્જ ક્રોમેટોગ્રાફી, શોષણ ક્રોમેટોગ્રાફી અને એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફીનો સમાવેશ થાય છે. જો જરૂરી હોય તો, તમે અંતિમ શુદ્ધિકરણ પ્રક્રિયા તરીકે ઝોન ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ, આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ સેટ વગેરે સહિત ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પણ પસંદ કરી શકો છો. પેટાવિભાગ સ્તરના વિભાજન માટે ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ સામાન્ય રીતે આયોજનમાં નાની છે, પરંતુ ઉચ્ચ રીઝોલ્યુશન સાથે.

સ્ફટિકીકરણ એ પ્રોટીન વિભાજન અને શુદ્ધિકરણની અંતિમ પ્રક્રિયા છે. જોકે સ્ફટિકીકરણ પ્રક્રિયા એ સુનિશ્ચિત કરતી નથી કે પ્રોટીન એકસરખું હોવું જોઈએ, તે ત્યારે જ થાય છે જ્યારે ચોક્કસ પ્રોટીનને સ્ફટિક બનાવવા માટે ઉકેલમાં ફાયદો થાય છે. સ્ફટિકીકરણ પ્રક્રિયા પોતે શુદ્ધિકરણની ચોક્કસ ડિગ્રી સાથે હોય છે, અને પુનઃપ્રક્રિયાકરણ ભેળસેળયુક્ત પ્રોટીનની થોડી માત્રાને દૂર કરી શકે છે. જ્યારથી ડિનેચર કરેલ છેપ્રોટીનસ્ફટિકીકરણ પ્રક્રિયા દરમિયાન ક્યારેય જોવા મળ્યું નથી, પ્રોટીન સ્ફટિકીકરણ એ માત્ર શુદ્ધતાની નિશાની નથી, પરંતુ ઉત્પાદન તેની કુદરતી સ્થિતિમાં છે તે નિર્ધારિત કરવા માટે એક શક્તિશાળી માર્ગદર્શિકા પણ છે.