ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ કૉલમ નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિ અને સિદ્ધાંત

ન્યુક્લીક એસિડને ડીઓક્સીરીબોન્યુક્લીક એસિડ (ડીએનએ) અને રિબોન્યુક્લીક એસિડ (આરએનએ) માં વિભાજિત કરવામાં આવે છે, જેમાંથી આરએનએને વિવિધ કાર્યો અનુસાર રિબોસોમલ આરએનએ (આરઆરએનએ), મેસેન્જર આરએનએ (એમઆરએનએ) અને ટ્રાન્સફર આરએનએ (ટીઆરએનએ) માં વિભાજિત કરી શકાય છે.

ડીએનએ મુખ્યત્વે ન્યુક્લિયસ, મિટોકોન્ડ્રિયા અને ક્લોરોપ્લાસ્ટ્સમાં કેન્દ્રિત છે, જ્યારે આરએનએ મુખ્યત્વે સાયટોપ્લાઝમમાં વિતરિત થાય છે.

કારણ કે પ્યુરિન પાયા અને પાયરિમિડીન પાયામાં ન્યુક્લીક એસિડમાં બેવડા બોન્ડ જોડાયેલા હોય છે, ન્યુક્લીક એસિડમાં અલ્ટ્રાવાયોલેટ શોષણની લાક્ષણિકતાઓ હોય છે. ડીએનએ સોડિયમ ક્ષારનું અલ્ટ્રાવાયોલેટ શોષણ લગભગ 260nm છે, અને તેનું શોષણ A260 તરીકે દર્શાવવામાં આવે છે, અને તે 230nm પર શોષણ ચાટ પર છે, તેથી અલ્ટ્રાવાયોલેટ સ્પેક્ટ્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. ન્યુક્લિક એસિડ્સ માત્રાત્મક અને ગુણાત્મક રીતે લ્યુમિનોમીટર દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે.

ન્યુક્લિક એસિડ એમ્ફોલિટ્સ છે, જે પોલિએસિડ્સની સમકક્ષ છે. ન્યુક્લીક એસિડને તટસ્થ અથવા આલ્કલાઇન બફરનો ઉપયોગ કરીને આયનોમાં વિભાજિત કરી શકાય છે, અને એનોડ તરફ જવા માટે ઇલેક્ટ્રિક ફિલ્ડમાં મૂકવામાં આવે છે. આ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસનો સિદ્ધાંત છે.

ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ કૉલમ નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિ અને સિદ્ધાંત

ન્યુક્લીક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ સિદ્ધાંતો અને જરૂરિયાતો

1. ન્યુક્લીક એસિડ પ્રાથમિક રચનાની અખંડિતતાની ખાતરી કરો

2. અન્ય પરમાણુઓના દૂષણને દૂર કરો (જેમ કે DNA બહાર કાઢતી વખતે RNA દખલને બાકાત રાખવું)

3. ન્યુક્લીક એસિડના નમૂનાઓમાં ઉત્સેચકોને અટકાવે તેવા કોઈ કાર્બનિક દ્રાવકો અને મેટલ આયનોની ઉચ્ચ સાંદ્રતા હોવી જોઈએ નહીં.

4. પ્રોટીન, પોલિસેકરાઇડ્સ અને લિપિડ્સ જેવા મેક્રોમોલેક્યુલર પદાર્થોને શક્ય તેટલું ઓછું કરો

ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ પદ્ધતિ

1. ફેનોલ/ક્લોરોફોર્મ નિષ્કર્ષણ પદ્ધતિ

તેની શોધ 1956માં થઈ હતી. ફિનોલ/ક્લોરોફોર્મ સાથે કોષ તૂટેલા પ્રવાહી અથવા પેશી હોમોજેનેટની સારવાર કર્યા પછી, ન્યુક્લિક એસિડ ઘટકો, મુખ્યત્વે ડીએનએ, જલીય તબક્કામાં ઓગળી જાય છે, લિપિડ્સ મુખ્યત્વે કાર્બનિક તબક્કામાં હોય છે, અને પ્રોટીન બંને વચ્ચે સ્થિત હોય છે. તબક્કાઓ

2. આલ્કોહોલનો વરસાદ

ઇથેનોલ ન્યુક્લીક એસિડના હાઇડ્રેશન સ્તરને દૂર કરી શકે છે અને નકારાત્મક રીતે ચાર્જ થયેલ ફોસ્ફેટ જૂથને બહાર લાવી શકે છે, અને NA﹢ જેવા સકારાત્મક ચાર્જ આયનો ફોસ્ફેટ જૂથ સાથે જોડાઈને અવક્ષેપ રચી શકે છે.

3. ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ પદ્ધતિ

ખાસ સિલિકા-આધારિત શોષણ સામગ્રી દ્વારા, ડીએનએ વિશિષ્ટ રીતે શોષી શકાય છે, જ્યારે આરએનએ અને પ્રોટીન સરળતાથી પસાર થઈ શકે છે, અને પછી ન્યુક્લીક એસિડને બાંધવા માટે ઉચ્ચ મીઠું અને નીચા pHનો ઉપયોગ કરે છે, અને ન્યુક્લિકને અલગ કરવા અને શુદ્ધ કરવા માટે નીચા મીઠું અને ઉચ્ચ pH સાથે એલ્યુટ. એસિડ

4. થર્મલ ક્રેકીંગ આલ્કલી પદ્ધતિ

આલ્કલાઇન નિષ્કર્ષણ મુખ્યત્વે સહસંયોજક રીતે બંધ ગોળાકાર પ્લાઝમિડ્સ અને રેખીય ક્રોમેટિન વચ્ચેના ટોપોલોજીકલ તફાવતોનો ઉપયોગ તેમને અલગ કરવા માટે કરે છે. આલ્કલાઇન પરિસ્થિતિઓમાં, વિકૃત પ્રોટીન દ્રાવ્ય હોય છે.

5. ઉકળતા પાયરોલિસિસ પદ્ધતિ

ડીએનએ સોલ્યુશનને સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા વિકૃત પ્રોટીન અને સેલ્યુલર કચરો દ્વારા રચાયેલા અવક્ષેપમાંથી ડીએનએ ટુકડાઓને અલગ કરવા માટે રેખીય ડીએનએ પરમાણુઓના ગુણધર્મોનો લાભ લેવા માટે ગરમીથી સારવાર કરવામાં આવે છે.

6. નેનોમેગ્નેટિક માળખા પદ્ધતિ

સુપરપેરામેગ્નેટિક નેનોપાર્ટિકલ્સની સપાટીને સુધારવા અને સુધારવા માટે નેનો ટેકનોલોજીનો ઉપયોગ કરીને, સુપરપેરામેગ્નેટિક સિલિકોન ઓક્સાઇડ નેનો-મેગ્નેટિક મણકા તૈયાર કરવામાં આવે છે. ચુંબકીય મણકા ખાસ કરીને માઇક્રોસ્કોપિક ઇન્ટરફેસ પર ન્યુક્લીક એસિડ પરમાણુઓને ઓળખી શકે છે અને અસરકારક રીતે જોડાઈ શકે છે. સિલિકા નેનોસ્ફિયર્સના સુપરપરમેગ્નેટિક ગુણધર્મોનો ઉપયોગ કરીને, ચાઓટ્રોપિક ક્ષાર (ગુઆનીડીન હાઇડ્રોક્લોરાઇડ, ગુઆનીડીન આઇસોથિયોસાયનેટ, વગેરે) અને બાહ્ય ચુંબકીય ક્ષેત્રની ક્રિયા હેઠળ, ડીએનએ અને આરએનએ રક્ત, પ્રાણી પેશીઓ, ખોરાક, રોગકારક સુક્ષ્મસજીવો અને અન્ય નમૂનાઓથી અલગ કરવામાં આવ્યા હતા.


પોસ્ટ સમય: માર્ચ-18-2022