ની પદ્ધતિઓપ્રોટીન શુદ્ધિકરણ:

પ્રોટીન શુદ્ધિકરણ, પ્રોટીનનું વિભાજન અને શુદ્ધિકરણની પદ્ધતિ, પ્રોટીન મૂળ કોષો અથવા પેશીઓમાંથી ઓગળેલી અવસ્થામાં મુક્ત થાય છે અને જૈવિક પ્રવૃત્તિ ગુમાવ્યા વિના મૂળ કુદરતી સ્થિતિમાં રહે છે. આ કારણોસર, સામગ્રીએ પ્રાણી અને ચરબીયુક્ત પેશીઓને દૂર કરવી જોઈએ, બીજની સામગ્રીએ ટેનીન જેવા પદાર્થોમાંથી બીજ કોટના દૂષણને પણ છાલવું જોઈએ, અને તેલના બીજને પ્રાધાન્યમાં ઓછા ઉકળતા કાર્બનિક દ્રાવકનો ઉપયોગ કરવો જોઈએ.

1. પ્રોટીન શુદ્ધિકરણની પદ્ધતિ, કદ અને અલગ અલગ વિશ્લેષણ પદ્ધતિઓ: ડાયાલિસિસ અને અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન આ પ્રોટીનનો ઉપયોગ અણુઓની પ્રકૃતિમાંથી પસાર થવા માટે કરે છે જે અર્ધ-પારગમ્ય પટલમાંથી પસાર થઈ શકતા નથી; ઘનતા ઢાળ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન માધ્યમમાં પ્રોટીનની ગુણવત્તા અને ઘનતા કણો પર વધુ અસર કરશે. પતાવટની ઝડપ ઝડપી છે; જેલ ફિલ્ટરેશન એ એક પ્રકારની કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફી છે.

2. ઉપયોગમાં દ્રાવ્યતાના તફાવતનું વિભાજન: ઇલેક્ટ્રો-અવક્ષેપ કારણ કે પ્રોટીન પરમાણુઓનો ચોખ્ખો ચાર્જ શૂન્ય આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ પર છે, જે પરમાણુઓ વચ્ચેના ઇલેકટ્રોસ્ટેટિક રિસ્પ્લેશનને ઘટાડે છે, એકંદર કરવા માટે સરળ અને ન્યૂનતમ દ્રાવ્યતા; મીઠાના દ્રાવણ સાથે વપરાતા મીઠાના દ્રાવણની સાંદ્રતા પ્રોટીનની દ્રાવ્યતામાં વધારો અથવા ઘટાડો કરે છે.

3. વિવિધ પદ્ધતિઓ દ્વારા ચાર્જને અલગ અને વિશ્લેષણ કરવામાં આવે છે, મુખ્ય સામગ્રીઓમાં ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ અને આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફીનો સમાવેશ થાય છે.

4. ની પદ્ધતિઓપ્રોટીન શુદ્ધિકરણપ્રોટીનનું પસંદગીયુક્ત શોષણ અને વિભાજન કણોના શોષણની શક્તિનો ઉપયોગ કરે છે.

5. એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી લિગાન્ડ્સના વિભાજન પર આધારિત છે. આ જૈવિક લાક્ષણિકતા પ્રોટીન પરમાણુઓને લિગાન્ડ તરીકે ઓળખાતા અન્ય પરમાણુ સાથે સહસંયોજક રીતે જોડવાને બદલે ખાસ બાંધવા દે છે.

6. પ્રોટીન શુદ્ધિકરણની પદ્ધતિ: નીચા-તાપમાનના કાર્બનિક દ્રાવક વરસાદની પદ્ધતિ: મોટાભાગના પ્રોટીનની દ્રાવ્યતા અને અવક્ષેપને ઘટાડવા માટે મિથેનોલ, ઇથેનોલ જેવા પાણી સાથે મિશ્રિત કાર્બનિક દ્રાવકનો ઉપયોગ કરો. આ પદ્ધતિ રીઝોલ્યુશન મીઠું આઉટ કરતા વધારે છે, પરંતુ પ્રોટીન વધુ ડિનેચર કરે છે જ્યારે સરળ હોય, ત્યારે તે નીચા તાપમાને થવું જોઈએ.

કેવી રીતે શુદ્ધ કરવુંપ્રોટીન શુદ્ધિકરણ:

પ્રોટીનને કેવી રીતે શુદ્ધ કરવું, પ્રોટીન એ એક વિશાળ પરમાણુ છે, અને આલ્બ્યુમિનનાં વિવિધ પરમાણુ કદ, પ્રોટીન અને નાના પરમાણુ પદાર્થોને અલગ કરવાની કેટલીક સરળ પદ્ધતિઓ છે, અને પ્રોટીન મિશ્રણને પણ અલગ કરી શકાય છે. વિવિધ પરમાણુ કદના પ્રોટીનને અલગ કરવાની મુખ્ય પદ્ધતિઓ છે ડાયાલિસિસ, અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન, જેલ ફિલ્ટરેશન અને સેન્ટ્રીફ્યુગલ સેપરેશન. ડાયાલિસિસ અને અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશનનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે પ્રોટીન અલગ કરવાની પદ્ધતિઓમાં થાય છે. અલગ કરવા માટેનું ડાયાલિસિસ મિશ્રણ અર્ધપારગમ્ય પટલની બનેલી ડાયાલિસિસ બેગમાં મૂકવામાં આવે છે, અને પછી અલગ કરવા માટે ડાયાલિસિસ સોલ્યુશનમાં ડૂબી જાય છે. અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન એ અર્ધ-પારગમ્ય પટલમાં કેન્દ્રત્યાગી બળ અથવા દબાણનો ઉપયોગ કરીને પાણી અને અન્ય નાના અણુઓને પસાર કરવાની અને અર્ધ-પારગમ્ય પટલમાં પ્રોટીનને ફસાવવાની પ્રક્રિયા છે. આ બે પદ્ધતિઓ પ્રોટીન-આધારિત મેક્રોમોલેક્યુલ્સ અને અકાર્બનિક મીઠું-આધારિત નાના અણુઓથી અલગ કરી શકાય છે. તે ઘણીવાર મીઠું ચડાવવામાં આવે છે, તેનો ઉપયોગ મીઠાના વિસર્જનની પદ્ધતિ સાથે કરવામાં આવે છે, અથવા અકાર્બનિક મીઠાના ઉકેલોનો ઉપયોગ કરીને મીઠું કર્યા પછી આ બે પદ્ધતિઓ બહાર કાઢવા માટે રજૂ કરી શકાય છે.

1. સૉલ્ટિંગ-આઉટ પદ્ધતિ દ્વારા પ્રોટીનને કેવી રીતે શુદ્ધ કરવું: સૉલ્ટિંગ-આઉટ પદ્ધતિનો આધાર એ છે કે મંદ મીઠાના દ્રાવણમાં પ્રોટીનની દ્રાવ્યતા મીઠાની સાંદ્રતાના વધારા સાથે વધશે, પરંતુ જ્યારે મીઠાની સાંદ્રતા ચોક્કસ મૂલ્ય સુધી વધે છે, પાણીની પ્રવૃત્તિમાં વધારો થશે. ઘટાડો, જે બદલામાં કેટલાક પ્રોટીન પરમાણુ માળખું સપાટી દ્વારા ચાર્જ ઉત્પન્ન કરવા માટેનું કારણ બની શકે છે ધીમે ધીમે તટસ્થ થઈ જાય છે, અને હાઇડ્રેશન મેમ્બ્રેન ધીમે ધીમે નાશ પામે છે, જે આખરે સંબંધિત પ્રોટીન અને પરમાણુઓને એકત્રીકરણ વિકસાવવા અને વિવિધ ઉકેલોમાંથી અવક્ષેપનું કારણ બની શકે છે.

2. કાર્બનિક દ્રાવક વરસાદની પદ્ધતિ: કાર્બનિક દ્રાવકોમાં પ્રોટીનની દ્રાવ્યતા ઘટાડવાના બે કારણો છે: ડિહાઇડ્રેશન સાથે મીઠાના દ્રાવણ તરીકે પ્રોટીનને કેવી રીતે શુદ્ધ કરવું; બીજું, ધ્રુવીય દ્રાવકોમાં પાણી કરતાં કાર્બનિક દ્રાવકોનો ડાઇલેક્ટ્રિક સ્થિરાંક ઘટાડી શકાય છે.

3. પ્રોટીન અવક્ષેપ કરનાર એજન્ટ: એક અવક્ષેપ કરનાર એજન્ટ તરીકે પ્રોટીન માત્ર એક પ્રકાર અથવા એક પ્રોટીન અવક્ષેપ પર કાર્ય કરે છે, સામાન્ય ક્ષારયુક્ત, પ્રોટીન, લેકટીન અને ભારે ધાતુઓ છે.

4. પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ વરસાદ: પાણીમાં દ્રાવ્ય બિન-આયોનિક પોલિમરને કેવી રીતે શુદ્ધ કરવુંપ્રોટીન શુદ્ધિકરણ, જેમ કે પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ અને સોડિયમ ડેક્સ્ટ્રાન સલ્ફેટ પ્રોટીનને અવક્ષેપિત કરવા માટે.