Separación áspera e separación fina da purificación de proteínas

A separación e purificación de proteínas é amplamente utilizada na investigación e aplicación da bioquímica e é unha importante habilidade operativa. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument compilou a separación bruta e o contido da separación finaproteínapurificación para todos. Unha célula eucariota típica pode conter miles de proteínas diferentes, algunhas son moi ricas e outras contén só unhas poucas copias. Para estudar unha determinada proteína, primeiro é necesario purificar a proteína doutras proteínas e moléculas non proteicas.

19

Separación groseira

Cando se obtén o extracto proteico (ás veces mesturado con ácidos nucleicos, polisacáridos, etc.), selecciónase un conxunto de métodos axeitados para separar o desexado.proteínadoutras impurezas. Xeralmente, este paso de separación usa métodos como o salgado, a acumulación de puntos isoeléctricos e o fraccionamento de disolventes orgánicos. Estes métodos caracterízanse pola simplicidade e unha gran capacidade de procesamento, que poden eliminar moitas impurezas e concentrar a solución de proteínas. Algúns extractos de proteínas son de gran volume e non son axeitados para a concentración por acumulación ou salgado. Podes escoller ultrafiltración, filtración en xel, secado ao baleiro por conxelación ou outros métodos de concentración.

Separación fina

Despois do fraccionamento aproximado da mostra, o volume é xeralmente pequeno e a maioría das impurezas foron eliminadas. Para unha purificación posterior, os métodos de cromatografía xeralmente inclúen filtración en xel, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de adsorción e cromatografía de afinidade. Se é necesario, tamén pode escoller a electroforese, incluíndo electroforese de zona, conxunto de puntos isoeléctricos, etc. como proceso de purificación final. O método utilizado para a separación do nivel de subdivisión é xeralmente pequeno na planificación, pero con alta resolución.

A cristalización é o proceso final de separación e purificación de proteínas. Aínda que o proceso de cristalización non garante que a proteína deba ser uniforme, é só cando unha determinada proteína ten vantaxe na solución para formar un cristal. O proceso de cristalización en si vai acompañado dun certo grao de purificación e a recristalización pode eliminar unha pequena cantidade de proteína adulterada. Desde desnaturalizadoproteínaNunca se atopou durante o proceso de cristalización, a cristalización de proteínas non só é un sinal de pureza, senón tamén unha poderosa directriz para determinar que o produto está no seu estado natural.


Hora de publicación: 19-nov-2020