Métodos e purificación de purificación de proteínas

Métodos depurificación de proteínas:

O método de purificación de proteínas, separación e purificación de proteínas, a proteína é liberada das células ou tecidos orixinais nun estado disolto e permanece no estado natural orixinal sen perda de actividade biolóxica. Por este motivo, o material debe eliminar o tecido animal e adiposo, o material da semente debe incluso eliminar a contaminación da capa da semente de substancias como os taninos, e a semente oleaxinosa debe usar preferiblemente un disolvente orgánico de baixo punto de ebulición.

1. O método de purificación de proteínas, tamaño e diferentes métodos de análise de separación: a diálise e a ultrafiltración usan estas proteínas para atravesar a natureza de moléculas que non poden atravesar a membrana semipermeable; centrifugación por gradiente de densidade A calidade e densidade da proteína no medio terá un maior impacto nas partículas. A velocidade de asentamento é máis rápida; A filtración en xel é unha especie de cromatografía en columna.

2. Separación da diferenza de solubilidade no uso: electro-precipitación porque a carga neta das moléculas de proteína está no punto isoeléctrico cero, reducindo a repulsión electrostática entre moléculas, fácil de agregar e solubilidade mínima; solución salina empregada con solución salina A concentración aumenta ou diminúe a solubilidade da proteína.

3. A carga sepárase e analízase por diferentes métodos, os contidos principais inclúen a electroforese e a cromatografía de intercambio iónico.

4. Métodos depurificación de proteínasA adsorción selectiva e a separación de proteínas utilizan a forza da adsorción de partículas.

5. A cromatografía de afinidade baséase na separación de ligandos. Esta característica biolóxica permite que as moléculas de proteínas se unan especificamente en lugar de covalentemente a outra molécula chamada ligando.

6. Método de purificación de proteínas: método de precipitación de disolventes orgánicos a baixa temperatura: use disolventes orgánicos miscibles con auga, como metanol, etanol, para reducir a solubilidade e precipitación da maioría das proteínas. Este método é maior que a resolución de sal para fóra, pero a proteína desnaturaliza máis Cando sexa fácil, debe facerse a baixa temperatura.

6ca4b93f5

Como purificarpurificación de proteínas:

Como purificar proteínas, a proteína é unha molécula grande, e varios tamaños moleculares de albúmina, hai algúns métodos máis sinxelos para separar proteínas e materiais de moléculas pequenas, e tamén separar a mestura de proteínas. Os principais métodos para separar proteínas de diferentes tamaños moleculares son a diálise, a ultrafiltración, a filtración en xel e a separación centrífuga. A diálise e a ultrafiltración úsanse habitualmente nos métodos de separación de proteínas. A mestura de diálise que se vai separar colócase nunha bolsa de diálise feita cunha membrana semipermeable e, a continuación, mergúllase na solución de diálise para a súa separación. A ultrafiltración é o proceso de facer pasar auga e outras moléculas pequenas usando forza ou presión centrífuga nunha membrana semipermeable e atrapando proteínas na membrana semipermeable. Estes dous métodos pódense separar das macromoléculas baseadas en proteínas e das pequenas moléculas baseadas en sales inorgánicas. Adoitan ser salgados, utilízanse xunto co método de disolución de sal ou pódense introducir para eliminar estes dous métodos despois do salgado usando solucións de sal inorgánica.

1. Como purificar a proteína mediante o método de sal: a base do método de sal é que a solubilidade da proteína na solución salina diluída aumentará co aumento da concentración de sal, pero cando a concentración de sal aumenta ata un determinado valor, o incrementarase a actividade da auga. Diminución, o que á súa vez pode facer que algunhas proteínas xeren cargas a través da superficie da estrutura molecular que se neutralicen gradualmente, e a membrana de hidratación destrúese gradualmente, o que pode eventualmente provocar que as proteínas e moléculas relacionadas desenvolvan aglomeración e precipiten a partir de diferentes solucións.

2. Método de precipitación de disolventes orgánicos: hai dúas razóns para reducir a solubilidade da proteína en disolventes orgánicos: como purificar a proteína como solución salina con deshidratación; en segundo lugar, a constante dieléctrica dos disolventes orgánicos que a auga pódese reducir en disolventes polares.

3. Axente precipitador de proteínas: a proteína como axente precipitante só actúa sobre un tipo ou un de precipitación de proteínas, os comúns son os alcalinos, proteicos, lectinas e metais pesados.

4. Precipitación de polietilenglicol: como purificar polímeros non iónicos solubles en auga parapurificación de proteínas, como o polietilenglicol e o sulfato de dextrano sódico para precipitar proteínas.


Hora de publicación: 27-Oct-2020