Dè an dòigh glanaidh ansiostam purchaidh pròtain? Feumar eòlas a bhith agad air an t-sreath DNA còdaidh den phròtain ghlan, gus faicinn dè na ceallan no na figheagan a tha ro àrd anns a’ ghine targaid, agus gus primers gine a dhealbhadh gus arf a ’chriomag DNA targaid àrdachadh. Is e seo an rud ris an canar togail mìrean gine targaid.
Togail vectar faireachdainn: Anns an vectar abairt prokaryotic no eukaryotic le feartan an abairt gine a fhuaireadh fhèin, is e prìomh dhuilgheadas a ’cheum seo am plasmid agus an gine ùidh a thogail, agus an siostam faireachdainn. Tha an ùine faireachdainn prokaryotic goirid, tha a’ chosgais ìosal, agus tha mòran faireachdainn na phrìomhachas; chan eil an gine air a chur an cèill ann an E. coli, agus tha an duilgheadas a 'tachairt ann an codon optimization. Le bhith a’ beachdachadh air gnìomhachd nas fheàrr agus glanadh a’ phròtain, roghnaich an luchd-rannsachaidh a bhith a’ cur an cèill ann am beirm Pichi. Tha e cudromach gun tèid codon optimization a chuir an cèill gu soirbheachail.
Dè an dòigh glanaidh a th’ aig an t-siostam glanaidh pròtain:
1. Sileadh.
2. Electrophoresis: Tha pròtain fo chasaid nas àirde no nas ìsle na a phuing isoelectric agus faodar a ghluasad chun an electrode àicheil no electrode dearbhach an raon dealain anns an raon dealain. Cuir taic ri electrophoresis film, electrophoresis, msaa.
3. Dialysis: Dòigh a chleachdas dà phoca dialysis gus moileciuilean mòra a sgaradh bho phròtainean agus todhar organach beag moileciuil.
4. Cromatography: Bidh cromatagrafaidheachd iomlaid ion a' cleachdadh feartan an-asgaidh phrotainnean. Fo pH sònraichte, tha cosgaisean agus feartan phròtainean eadar-dhealaichte, agus faodaidh iad a bhith air an sgaradh le cromatagrafaidheachd iomlaid ion. Ann an cromatagrafaidheachd iomlaid anion, tha pròtanan le cumhachd àicheil ìosal air an cuir às an toiseach. Criathar moileciuil, ris an canar cuideachd sìoladh gel. Bidh pròtanan beaga a’ dol a-steach do na pores agus a’ fuireach annta airson ùine mhòr. Chan urrainn dha pròtanan mòra a dhol a-steach do na pores agus sruthadh a-mach gu dìreach.
5. Dè an dòigh glanaidh ansiostam purchaidh pròtain? Ultracentrifugation: Faodar glanadh pròtain a chleachdadh gus an cuideam moileciuil a dhearbhadh agus faodar a chleachdadh mar phròtain. Tha cruthachadh pròtainean le dùmhlachd eadar-dhealaichte air a sgaradh.
Ùine puist: Giblean-21-2021