Tha searbhag niuclasach air a roinn ann an searbhag deoxyribonucleic (DNA) agus searbhag ribonucleic (RNA), am measg sin faodar RNA a roinn ann an RNA ribosomal (rRNA), RNA teachdaire (mRNA) agus RNA gluasaid (tRNA) a rèir diofar dhleastanasan.

Tha DNA gu ìre mhòr stèidhichte anns na niuclas, mitochondria agus cloroplasts, agus tha RNA air a chuairteachadh sa mhòr-chuid anns an cytoplasm.

Leis gu bheil bannan dùbailte co-cheangailte ri bunaitean purine agus bunaitean pyrimidine ann an searbhagan niuclasach, tha feartan sùghadh ultraviolet aig aigéid niuclasach. Tha in-ghabhail ultraviolet de shalainn sodium DNA timcheall air 260nm, agus tha an sùgh aige air a chuir an cèill mar A260, agus tha e aig an amar sùghaidh aig 230nm, agus mar sin faodar speactroscopaidh ultraviolet a chleachdadh. Tha aigéid niuclasach air an dearbhadh gu cainneachdail agus gu càileachdail le luminometer.

Tha aigéid niuclasach ampholytes, a tha co-ionann ri polyacids. Faodar searbhagan niuclasach a sgaradh gu uinneanan le bhith a’ cleachdadh bufairean neodrach no alcaileach, agus an cur ann an raon dealain gus gluasad a dh’ ionnsaigh an anod. Is e seo am prionnsapal electrophoresis.

Prionnsabalan agus riatanasan às-tharraing agus glanadh searbhag niuclasach

1. Dèanamh cinnteach à ionracas nucleic acid bun-structair

2. Cuir às do thruailleadh mholacilean eile (leithid a bhith a’ cumail a-mach bacadh RNA nuair a thathar a’ toirt a-mach DNA)

3. Cha bu chòir solventan organach agus dùmhlachd àrd de ianan meatailt a bhith ann a chuireas bacadh air enzyman ann an sampallan searbhag niuclasach

4. Lùghdaich stuthan macromolecular leithid pròtainean, polysaccharides agus lipids cho mòr 'sa ghabhas

Modh às-tharraing agus glanadh searbhag niuclasach

1. Dòigh às-tharraing phenol/cloroform

Chaidh a chruthachadh ann an 1956. Às deidh làimhseachadh an leaghan briste cealla no maothran aon-ghnèitheach le phenol / cloroform, tha na co-phàirtean searbhag niuclasach, DNA sa mhòr-chuid, air an sgaoileadh anns an ìre uisgeach, tha lipids sa mhòr-chuid anns an ìre organach, agus tha pròtanan suidhichte eadar an dà ìrean.

2. Deoch-làidir sileadh

Faodaidh ethanol cuir às don ìre uisgeachaidh de dh ’aigéad niuclasach agus a’ bhuidheann fosfáit le cosgais àicheil a nochdadh, agus faodaidh ions le deagh chasaid leithid NA﹢ a dhol còmhla ris a ’bhuidheann fosfáit gus sileadh a chruthachadh.

3. Modh colbh cromatagrafach

Tron stuth sònraichte stèidhichte air silica, faodar DNA a shanasachadh gu sònraichte, fhad ‘s as urrainn dha RNA agus pròtain a dhol troimhe gu rèidh, agus an uairsin salann àrd agus pH ìosal a chleachdadh gus searbhag niuclasach a cheangal, agus elute le salann ìosal agus pH àrd gus nucleic a sgaradh agus a ghlanadh. searbhag.

4. Modh alkali sgàineadh teirmeach

Bidh às-tharraing alcaileach sa mhòr-chuid a’ cleachdadh nan eadar-dhealachaidhean topological eadar plasmids cruinn dùinte le covalent agus cromatin sreathach airson an sgaradh. Fo chumhachan alcaileach, tha pròtanan dì-nàdurrach so-sgaoilte.

5. Modh pyrolysis boiling

Tha am fuasgladh DNA air a làimhseachadh le teas gus brath a ghabhail air feartan moileciuil DNA sreathach gus mìrean DNA a sgaradh bhon sileadh a chaidh a chruthachadh le pròtanan dì-nàdurrach agus sprùilleach cealla le bhith a’ toirt a-steach centrifugation.

6. Modh grìogagan nanomagnetic

A’ cleachdadh nanicneòlas gus uachdar nanoparticles superparamagnetic a leasachadh agus atharrachadh, thathas ag ullachadh grìogagan nano-magnetic silicon oxide superparamagnetic. Faodaidh na grìogagan magnetach aithneachadh gu sònraichte agus ceangal gu h-èifeachdach ri moileciuilean searbhag niuclasach air eadar-aghaidh microscopach. A’ cleachdadh feartan superparamagnetic nan nanospheres silica, fo ghnìomhachd salainn Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, msaa) agus raon magnetach taobh a-muigh, chaidh DNA agus RNA a sgaradh bho fhuil, maothran bheathaichean, biadh, meanbh-fhàs-bheairtean pathogenic agus sampallan eile .