Tha dealachadh agus glanadh phròtainean air a chleachdadh gu farsaing ann an rannsachadh agus cleachdadh bith-cheimigeachd agus tha e na sgil obrachaidh cudromach. Faodaidh mìltean de phrotainnean eadar-dhealaichte a bhith ann an cealla eukaryotic àbhaisteach, tha cuid dhiubh gu math beairteach agus chan eil ann an cuid ach beagan leth-bhreacan. Gus sgrùdadh sònraichte a dhèanamhpròtain, feumar an toiseach am pròtain a ghlanadh bho phròtainean eile agus moileciuilean neo-phròtain.

1. Modh sailleadh-a-mach depròtain:

Tha buaidh mhòr aig salann neodrach air solubility pròtain. San fharsaingeachd, le àrdachadh ann an dùmhlachd salainn fo cho-chruinneachadh salainn ìosal, tha solubility pròtain ag àrdachadh. Canar sailleadh ris an seo; nuair a tha an ìre salainn a 'sìor dhol am meud, bidh sùbailteachd pròtain a' lùghdachadh gu diofar ìrean agus a 'sgaradh a-mach aon às dèidh a chèile. Canar sailleadh a-mach ris an iongantas seo.

2. Isoelectric puing cruachadh dòigh:

Is e an ath-bhualadh electrostatach eadar gràineanan an ìre as lugha nuair a tha am pròtain statach, agus mar sin is e an solubility cuideachd an ìre as lugha. Tha na puingean isoelectric de dhiofar phròtainean eadar-dhealaichte. Faodar pH an fhuasglaidh fionnarachaidh a chleachdadh gus puing isoelectric pròtain a ruighinn Thoir air cruinneachadh, ach is ann ainneamh a thathas a’ cleachdadh an dòigh seo leis fhèin agus faodar a chur còmhla ris an dòigh sailleadh.

3.Dialysis agus ultrafiltration:

Bidh dialysis a’ cleachdadh membran leth-rùisgte gus pròtanan de dhiofar mheudan moileciuil a sgaradh. Bidh an dòigh ultrafiltration a’ cleachdadh cuideam àrd no feachd ceud-ghluasadach gus toirt air uisge agus moileciuilean solute beaga eile a dhol tro membran leth-permeable, fhad ‘s a tha anpròtainair fhàgail air an membran. Faodaidh tu diofar mheudan pore a thaghadh gus casg a chuir air pròtainean de dhiofar cuideaman moileciuil.

Modh sìoltachaidh 4.Gel:

Cuideachd ris an canar cromatagrafaidheachd às-dùnadh meud no cromatagrafaidheachd criathar moileciuil, is e seo aon de na dòighean as fheumaile airson measgachadh pròtain a sgaradh a rèir meud moileciuil. Is e na stuthan pacaidh as cumanta anns a’ cholbh gel glucose (Sephadex ged) agus gel agarose (gal agarose).

5.Electrophoresis:

Fon aon chumha pH, faodar diofar phròtainean a sgaradh air sgàth an cuideaman moileciuil eadar-dhealaichte agus na cosgaisean eadar-dhealaichte anns an raon dealain. Is fhiach aire a thoirt do electrophoresis seata isoelectric, a bhios a’ cleachdadh ampholyte mar neach-giùlain. Rè electrophoresis, bidh an ampholyte a 'cruthachadh caisead pH air a chur ris mean air mhean bhon electrode dearbhach chun an dealan àicheil. Nuair a bhios am pròtain le cosgais sònraichte a 'snàmh ann, ruigidh e a chèile. Tha suidheachadh pH a’ phuing dealain neo-leantainneach, agus faodar an dòigh seo a chleachdadh gus diofar phròtainean a mhion-sgrùdadh agus ullachadh.

6.Ion conaltraidh chromatography:

Tha riochdairean conaltraidh ion a’ toirt a-steach riochdairean conaltraidh cationic (leithid carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) agus riochdairean conaltraidh anionic (diethylaminoethyl cellulose). Nuair a thèid thu tron ​​​​cholbh cromatagrafaidheachd conaltraidh ion, tha am pròtain leis a’ chosgais eile don àidseant conaltraidh ion air a shanasachadh air an àidseant conaltraidh ian, agus an uairsin air a shanasachadhpròtainair a chuir às le bhith ag atharrachadh pH no neart ionic.

7.Affinity cromatagrafaidheachd:

Tha cromatagrafaidheachd dàimh na dhòigh air leth feumail airson pròtanan a sgaradh. Gu tric chan fheum e ach aon cheum gus pròtain sònraichte a sgaradh airson a ghlanadh bho mheasgachadh pròtain meallta le fìor fhìor-ghlan.

Tha an dòigh seo stèidhichte air ceangal sònraichte seach covalent de phròtainean sònraichte ri moileciuil eile ris an canar ligand (Ligand).

Am prionnsapal bunaiteach:

tha pròtanan ann am measgachadh meallta ann am figheagan no ceallan, agus tha mìltean de phròtainean eadar-dhealaichte anns gach seòrsa cealla. Mar sin, tha an eadar-dhealachadh eadar pròtainean na phàirt chudromach de bhith-cheimigeachd, agus chan eil e air a bhith leis fhèin. No faodaidh seata de dhòighean deiseil seòrsa sam bith de phròtain a thoirt air falbh bho phròtain measgaichte meallta, agus mar sin bidh grunn dhòighean air an cleachdadh gu tric còmhla.