Dòighean-obrach agus purification pròtain purification

Dòighean-obrach apurchadh pròtain:

An dòigh air purchadh pròtain, dealachadh agus glanadh pròtain, tha am pròtain air a leigeil ma sgaoil bho na ceallan no na figheagan tùsail ann an staid leaghte agus a ’fuireach anns an stàit nàdarra tùsail gun a bhith a’ call gnìomhachd bith-eòlasach. Air an adhbhar seo, bu chòir don stuth stuth beathach is geir a thoirt air falbh, bu chòir don stuth sìl eadhon truailleadh a’ chòta sìl a thoirt air falbh bho stuthan leithid tannins, agus b’ fheàrr le sìol ola a bhith a’ cleachdadh fuasgladh organach le goil ìosal.

1. An dòigh air purchadh pròtain, meud agus dòighean sgrùdaidh dealachaidh eadar-dhealaichte: bidh dialysis agus ultrafiltration a’ cleachdadh na pròtanan sin gus a dhol tro nàdar moileciuilean nach urrainn a dhol tron ​​membran leth-rùisgte; centrifugation caisead dùmhlachd Bheir càileachd agus dùmhlachd a’ phròtain sa mheadhan buaidh nas motha air gràineanan. Tha astar rèiteachaidh nas luaithe; Is e seòrsa de chromatography colbh a th’ ann an sìoladh gel.

2. Dealachadh eadar-dhealachadh solubility ann an cleachdadh: electro-sileadh leis gu bheil cosgais lom de mholacilean pròtain aig ìre neoni isoelectric, a ’lughdachadh ath-bhualadh electrostatach eadar moileciuilean, furasta a chruinneachadh, agus solubility as ìsle; fuasgladh salainn air a chleachdadh le fuasgladh salainn Bidh an dùmhlachd ag àrdachadh no a’ lughdachadh solubility a’ phròtain.

3. Tha an t-uallach air a sgaradh agus air a sgrùdadh le diofar dhòighean, tha a 'phrìomh stuth a' gabhail a-steach electrophoresis agus cromatagrafaidheachd iomlaid ion.

4. Dòighean-obrachpurchadh pròtainBidh an taghadh agus an dealachadh de phròtainean a’ cleachdadh neart sùghadh mìrean.

5. Tha cromatagrafaidheachd dàimh stèidhichte air sgaradh ligands. Tha am feart bith-eòlasach seo a’ leigeil le moileciuilean pròtain ceangal gu sònraichte seach gu covalently ri moileciuil eile ris an canar ligand.

6. Modh purchaidh pròtain: Modh sileadh fuasglaidh organach aig teòthachd ìosal: Cleachd solventan organach a tha measgaichte le uisge, leithid methanol, ethanol, gus solubility agus sileadh a’ mhòr-chuid de phròtainean a lughdachadh. Tha an dòigh seo nas àirde na an rùn a 'sailleadh a-mach, ach tha am pròtain a' diùltadh barrachd Nuair a tha e furasta, bu chòir a dhèanamh aig teòthachd ìseal.

6ca4b93f5

Ciamar a ghlanadhpurchadh pròtain:

Mar a ghlanas tu pròtain, tha pròtain na mholacile mòr, agus diofar mheudan moileciuil de albumin, tha dòighean nas sìmplidh ann airson pròtain agus stuthan beaga moileciuil a sgaradh, agus cuideachd measgachadh pròtain sgaraichte. Is e na prìomh dhòighean air pròtanan de dhiofar mheudan moileciuil a sgaradh dialysis, ultrafiltration, sìoladh gel, agus sgaradh ceud-ghluasadach. Bithear a’ cleachdadh dialysis agus ultrafiltration gu cumanta ann an dòighean dealachaidh pròtain. Tha am measgachadh dialysis a thèid a sgaradh air a chuir ann am baga dialysis air a dhèanamh le membran semipermeable, agus an uairsin air a bhogadh anns an fhuasgladh dialysis airson dealachadh. Is e ultrafiltration am pròiseas a bhith a’ dol seachad air uisge agus moileciuilean beaga eile a’ cleachdadh feachd no cuideam ceud-ghluasadach ann an membran leth-rùisgte agus a’ glacadh phròtainean anns an membran leth-thrèigte. Faodar an dà dhòigh seo a sgaradh bho macromolecules stèidhichte air pròtain agus moileciuilean beaga neo-organach stèidhichte air salann. Bidh iad gu tric air an sailleadh, air an cleachdadh còmhla ris an dòigh sgaoilidh salainn, no faodar an toirt a-steach gus an dà dhòigh seo a thoirt a-mach às deidh an sailleadh le fuasglaidhean salainn neo-organach.

1. Mar a ghlanas tu pròtain le modh sailleadh: Is e bunait an dòigh sailleadh gum bi sùbailteachd pròtain ann am fuasgladh salainn caolaichte ag àrdachadh le àrdachadh dùmhlachd salainn, ach nuair a tha an ìre salainn ag àrdachadh gu luach sònraichte, bidh an thèid gnìomhachd uisge a mheudachadh. Lùghdachadh, a dh’ fhaodadh cuid de phròtainean cosgaisean a ghineadh tro uachdar structar moileciuil a bhith air an neodachadh mean air mhean, agus an membran uisgeachaidh air a sgrios mean air mhean, a dh’ adhbhraicheas mu dheireadh pròtanan agus moileciuilean co-cheangailte ri bhith a’ leasachadh cruinneachadh agus sileadh bho dhiofar fhuasglaidhean.

2. Modh sileadh fuasglaidh organach: Tha dà adhbhar ann airson solubility pròtain ann an solventan organach a lughdachadh: mar a ghlanas tu pròtain mar fhuasgladh salainn le dehydration; san dàrna h-àite, faodar an seasmhach dielectric de fhuasglaidhean organach na uisge a lughdachadh ann am fuasglaidhean pòlach.

3. Protein precipitating àidseant: pròtain mar precipitating àidseant ag obair a-mhàin air aon seòrsa no aon de pròtain sileadh, tha cumanta a tha alcaileach, pròtain, lectin, agus meatailtean trom.

4. Sileadh polyethylene glycol: Mar a ghlanas tu polymers neo-ionic a tha soluiteach ann an uisge airsonpurchadh pròtain, leithid polyethylene glycol agus sodium dextran sulfate gus pròtanan a dhùsgadh.


Ùine puist: Dàmhair-27-2020