Tá aigéad núicléach roinnte ina aigéad deocsiribonúicléach (DNA) agus aigéad ribonucleic (RNA), ina measc is féidir RNA a roinnt ina RNA ribosomal (rRNA), RNA teachtaire (mRNA) agus RNA aistrithe (tRNA) de réir feidhmeanna éagsúla.

Tá DNA comhchruinnithe go príomha sa núicléas, mitochondria agus clóraplastaí, agus déantar RNA a dháileadh go príomha sa chíteaplasma.

Toisc go bhfuil bannaí dúbailte comhchuingeacha in aigéid núicléacha ag bunanna purine agus bunanna pirimidín, tá tréithe ionsú ultraivialait ag aigéid núicléacha. Tá ionsú ultraivialait salainn sóidiam DNA thart ar 260nm, agus cuirtear a ionsúchán in iúl mar A260, agus tá sé ag an umar ionsú ag 230nm, mar sin is féidir speictreascópacht ultraivialait a úsáid. Déantar aigéid núicléacha a chinneadh go cainníochtúil agus go cáilíochtúil le luminometer.

Is amfailítí iad aigéid núicléacha, atá comhionann le polaiaigéid. Is féidir aigéid núicléasacha a dhícheangal ina n-ainiúin trí úsáid a bhaint as maoláin neodracha nó alcaileacha, agus iad a chur i réimse leictreach chun bogadh i dtreo an anóid. Is é seo prionsabal na leictreafóiréis.

Prionsabail agus ceanglais maidir le heastóscadh agus íonú aigéid núicléigh

1. Cinntigh sláine struchtúr príomhúil aigéad núicléiche

2. Deireadh a chur le héilliú móilíní eile (mar shampla trasnaíocht RNA a eisiamh nuair a bhíonn DNA á bhaint amach)

3. Níor cheart go mbeadh aon tuaslagóirí orgánacha agus tiúchan ard d'ian miotail a chuireann bac ar einsímí i samplaí aigéad núicléasach

4. Substaintí macromolecular cosúil le próitéiní, polaisiúicrídí agus lipidí a laghdú a oiread agus is féidir

Modh eastósctha agus íonú aigéid núicléigh

1. Modh eastósctha feanól/clóraform

Ceapadh é i 1956. Tar éis an leacht briste cille nó an fíochán aonchineálach a chóireáil le feanól / clóraform, déantar na comhpháirteanna aigéid núicléacha, go príomha DNA, a thuaslagadh sa chéim uiscí, tá lipidí den chuid is mó sa chéim orgánach, agus tá próitéiní suite idir an dá cheann. céimeanna.

2. Deisceadh alcóil

Is féidir le eatánól deireadh a chur leis an gciseal hiodráitithe d'aigéad núicléach agus an grúpa fosfáit atá luchtaithe go diúltach a nochtadh, agus is féidir le hiain atá luchtaithe go deimhneach mar NA﹢ teacht le chéile leis an ngrúpa fosfáit chun deascán a dhéanamh.

3. Modh colún crómatagrafach

Tríd an ábhar asaithe speisialta atá bunaithe ar shilice, is féidir DNA a asaithe go sonrach, agus is féidir le RNA agus próitéin dul tríd go réidh, agus ansin ard-salann agus pH íseal a úsáid chun aigéad núicléach a cheangal, agus elute le salann íseal agus pH ard a scaradh agus a íonú núicléach aigéad.

4. Modh alcaile scoilteadh teirmeach

Úsáideann eastóscadh alcaileach go príomha na difríochtaí topolaíochta idir plasmidí ciorclach atá dúnta go comhfhiúsach agus crómatin líneach chun iad a scaradh. Faoi choinníollacha alcaileach, tá próitéiní dínádúraithe intuaslagtha.

5. Modh pirealú fiuchphointe

Déantar an tuaslagán DNA a teaschóireáil chun leas a bhaint as airíonna móilíní DNA líneacha chun blúirí DNA a scaradh ón deascán a fhoirmíonn próitéiní dínádúraithe agus smionagar ceallacha trí lártheifneoiriú.

6. Modh coirníní nanomagnetic

Ag baint úsáide as nanaitheicneolaíocht chun dromchla na nanacháithníní superparamagnetic a fheabhsú agus a mhodhnú, ullmhaítear coirníní nana-mhaighnéadacha ocsaíd sileacain superparamagnetic. Is féidir leis na coirníní maighnéadacha a aithint go sonrach agus a cheangal go héifeachtach le móilíní aigéid núicléacha ar chomhéadan micreascópach. Ag baint úsáide as airíonna superparamagnetic na nanaspheres shilice, faoi ghníomhaíocht salainn Chaotrópacha (hidreaclóiríd guanidine, isothiocyanate guanidine, etc.) agus réimse maighnéadach seachtrach, scoiteadh DNA agus RNA ó fhuil, fíocháin ainmhithe, bia, microorganisms pataigineacha agus samplaí eile.