Wat is de suvering metoade fan deprotein suvering systeem? It is needsaaklik om de kodearjende DNA-sekwinsje fan it suvere proteïne te kennen, om te sjen hokker sellen of weefsels yn it doelgen oerútdrukt wurde, en gen-primers te ûntwerpen om de arf fan it doel-DNA-fragmint te fersterkjen. Dit is de saneamde oanwinst fan doelgenfragminten.

Konstruksje fan ekspresjevektor: Yn 'e prokaryotyske of eukaryotyske ekspresjevektor mei de skaaimerken fan' e krigen geneekspresje sels, is it haadprobleem fan dizze stap it konstruearjen fan it plasmid en it gen fan belang, en it ekspresjesysteem. De prokaryotic ekspresje tiid is koart, de kosten is leech, en in grut bedrach fan útdrukking is in prioriteit; it gen wurdt net útdrukt yn E. coli, en it probleem komt foar yn codon optimalisaasje. Mei it each op bettere aktiviteit en suvering fan it proteïne, keas de ûndersikers út te ekspresje yn Pichi gist. Súksesfolle ekspresje fan codonoptimalisaasje is wichtich.

Wat is de suveringsmetoade fan it proteïnereinigingssysteem:

1. delslach.

2. Electrophoresis: In opladen proteïne is heger of leger as syn isoelektryske punt en kin ferpleatst wurde nei de negative elektrodes of de positive elektrodes fan it elektryske fjild yn it elektryske fjild. Stypje filmelektroforese, elektroforese, ensfh.

3. Dialysis: In metoade dy't twa dialysesekken brûkt om grutte molekulen te skieden fan aaiwiten en lytse molekulêre organyske ferbiningen.

4. Chromatography: Ionen útwikseling chromatography brûkt de frije eigenskippen fan aaiwiten. Under in spesifike pH binne de ladingen en eigenskippen fan aaiwiten oars, en se kinne wurde skieden troch ionútwikselingchromatografy. Yn anion-útwikselingchromatografy wurde proteïnen mei lege negative krêft earst eluearre. Molekulêre sieves, ek wol bekend as gelfiltraasje. Lytse aaiwiten komme yn 'e poaren en bliuwe yn har foar in lange tiid. Grutte aaiwiten kinne net yn 'e poaren komme en streame direkt út.

5. Wat is de suvering metoade fan deprotein suvering systeem? Ultracentrifugation: Protein suvering kin brûkt wurde om te bepalen it molekulêre gewicht en kin brûkt wurde as it aaiwyt. De formaasje fan aaiwiten mei ferskate tichtens wurdt skieden.