SPE bestiet al tsientallen jierren, en foar goede reden. As wittenskippers eftergrûnkomponinten fan har samples wolle ferwiderje, wurde se konfrontearre mei de útdaging om dit te dwaan sûnder har fermogen te ferminderjen om de oanwêzigens en kwantiteit fan har gearstalling fan belang krekt en sekuer te bepalen. SPE is ien technyk dy't wittenskippers faak brûke om har samples te helpen foar de gefoelige ynstrumintaasje dy't brûkt wurdt foar kwantitative analyse. SPE is robúst, wurket foar in breed skala oan stekproeftypen, en nije SPE-produkten en metoaden wurde fierder ûntwikkele. Yn it hert fan it ûntwikkeljen fan dy metoaden is in wurdearring dat ek al stiet it wurd "chromatografy" net yn 'e namme fan' e technyk, SPE is dochs in foarm fan chromatografyske skieding.

SPE: The Silent Chromatography

Der is in âld siswize "as in beam yn in bosk falt, en der is gjinien om it te hearren, makket it dan noch in lûd?" Dat sprekwurd docht ús tinken oan SPE. Dat kin frjemd wêze om te sizzen, mar as wy tinke oan SPE, wurdt de fraach "as in skieding plakfynt en d'r is gjin detektor om it op te nimmen, hat chromatografy dan echt bard?" Yn it gefal fan SPE is it antwurd in klinkende "ja!" By it ûntwikkeljen of oplossen fan in SPE-metoade kin it heul nuttich wêze om te ûnthâlden dat SPE gewoan chromatografy is sûnder it chromatogram. As jo ​​​​deroan tinke, die Mikhail Tsvet, bekend as "de heit fan chromatografy", net wat wy hjoed "SPE" soene neame? Doe't er syn mingsels fan plant pigminten skieden troch te litten swiertekrêft drage se, oplost yn in oplosmiddel, troch in bêd fan grûn up krijt, wie it dat folle oars as in moderne SPE metoade?

Jo Sample begripe

Sûnt SPE is basearre op chromatografyske prinsipes, is it hert fan elke goede SPE-metoade de relaasje tusken de analyten, de matrix, de stasjonêre faze (de SPE-sorbint), en de mobile faze (de solvents dy't brûkt wurde om it monster te waskjen of te eluearjen) .

De aard fan jo stekproef safolle mooglik begripe is it bêste plak om te begjinnen as jo in SPE-metoade moatte ûntwikkelje of problemen oplosse. Om ûnnedige probearjen en flater te foarkommen tidens metoadeûntwikkeling, binne beskriuwingen fan 'e fysike en gemyske eigenskippen fan sawol jo analyten as de matrix heul nuttich. As jo ​​​​ienris witte oer jo stekproef, sille jo yn in bettere posysje wêze om dat stekproef te passen mei in passend SPE-produkt. Bygelyks, it kennen fan 'e relative polariteit fan' e analyten yn ferliking mei elkoar en de matrix kin jo helpe beslute as it brûken fan polariteit om analyten te skieden fan 'e matrix de juste oanpak is. Witten oft jo analyten neutraal binne of kinne bestean yn opladen steaten, kin jo ek helpe om jo nei SPE-produkten te rjochtsjen dy't spesjalisearje yn it behâld of eluearjen fan neutralen, posityf laden of negatyf laden soarten. Dizze twa konsepten fertsjintwurdigje twa fan 'e meast brûkte analyteigenskippen om te benutten by it ûntwikkeljen fan SPE-metoaden en it selektearjen fan SPE-produkten. As jo ​​​​jo analyten en de promininte matrixkomponinten yn dizze termen kinne beskriuwe, binne jo ûnderweis om in goede rjochting te kiezen foar jo SPE-metoadeûntwikkeling.

Skieding troch Affinity

De prinsipes dy't de skiedingen beskiede dy't foarkomme binnen in LC-kolom, bygelyks, binne oan it spyljen yn in SPE-skieding. De basis fan elke chromatografyske skieding is it oprjochtsjen fan in systeem dat ferskate graden fan ynteraksje hat tusken de komponinten fan 'e stekproef en de twa fazen oanwêzich yn kolom as SPE-cartridge, de mobile faze en de stasjonêre faze.

Ien fan 'e earste stappen om noflik te fielen mei SPE-metoadeûntwikkeling is in fertroud te hawwen mei de twa meast foarkommende soarten ynteraksjes dy't brûkt wurde yn SPE-skieding: polariteit en / of ladingstatus.

Polariteit

As jo ​​​​polariteit sille brûke om jo stekproef op te romjen, is ien fan 'e earste keuzes dy't jo moatte meitsje om te besluten hokker "modus" it bêste is. It is it bêste om te wurkjen mei in relatyf poal SPE-medium en in relatyf net-polêre mobile faze (dus normale modus) of it tsjinoerstelde, in relatyf net-poal SPE-medium keppele mei in relatyf poaler mobile faze (dus omkearde modus, sa neamd krekt om't it it tsjinoerstelde is fan 'e ynearsten fêststelde "normale modus").

As jo ​​SPE-produkten ferkenne, sille jo fine dat SPE-fazen besteane yn in ferskaat oan polariteiten. Boppedat biedt de kar fan solvent foar mobile faze ek in breed oanbod fan polariteiten, faaks tige ynstelber troch it brûken fan blends fan solvents, buffers, of oare tafoegings. D'r is in grutte graad fan finesse mooglik by it brûken fan polariteitsferskillen as de kaaikenmerk om te eksploitearjen om jo analyten te skieden fan matrix-ynterferinsjes (of fan elkoar).

Hâld gewoan it âlde chemie-adage "lykas oplost as" yn gedachten as jo polariteit beskôgje as de sjauffeur foar skieding. Hoe mear in ferbining is oan 'e polariteit fan in mobile of stasjonêre faze, hoe mear kâns dat it sterker ynteraksje sil. Sterkere ynteraksjes mei de stasjonêre faze liede ta langere retensjes op it SPE-medium. Sterke ynteraksjes mei de mobile faze liede ta minder retinsje en eardere eluaasje.

Charge State

As de analyten fan belang òf altyd bestean yn in laden steat òf kinne wurde set yn in laden steat troch de betingsten fan de oplossing dêr't se binne oplost yn (bygelyks pH), dan in oar machtich middel om se te skieden fan 'e matrix (of elk) oare) is troch it brûken fan SPE-media dy't se kinne lûke mei in eigen lading.

Yn dit gefal jilde klassike elektrostatyske attraksjeregels. Oars as skiedingen dy't betrouwe op polariteitskaaimerken en it "lykas oplost lykas" model fan ynteraksjes, operearje laden steat ynteraksjes op 'e regel fan "tsjinstellingen lûke." Jo kinne bygelyks in SPE-medium hawwe dat in positive lading op har oerflak hat. Om dat posityf opladen oerflak te balansearjen, is der yn 't earstoan in negatyf opladen soarte (in anion) dêroan bûn. As jo ​​negatyf opladen analyt wurdt yntrodusearre yn it systeem, it hat de mooglikheid fan it ferpleatsen fan de ynearsten bûn anion en ynteraksje mei de posityf opladen SPE oerflak. Dit resulteart yn behâld fan 'e analyt op' e SPE-faze. Dit wikseljen fan anionen wurdt "Anion Exchange" neamd en is mar ien foarbyld fan 'e bredere kategory fan "Ion Exchange" SPE-produkten. Yn dit foarbyld soe posityf opladen soarten in sterke stimulâns hawwe om yn 'e mobile faze te bliuwen en net ynteraksje mei it posityf opladen SPE-oerflak, sadat se net bewarre wurde. En, útsein as it SPE-oerflak oare skaaimerken hie neist syn ion-útwikselingseigenskippen, soene neutrale soarten ek minimaal behâlden wurde (hoewol't sokke blende SPE-produkten besteane, wêrtroch jo ion-útwikseling en omkearde faze-retentinsjemeganismen kinne brûke yn itselde SPE-medium ).

In wichtich ûnderskied om yn gedachten te hâlden by it brûken fan ion-útwikselingsmeganismen is de aard fan 'e ladingsteat fan' e analyt. As de analyt altyd opladen wurdt, nettsjinsteande de pH fan 'e oplossing wêryn it is, wurdt it beskôge as in "sterke" soarte. As de analyt allinich ûnder bepaalde pH-betingsten opladen wurdt, wurdt it beskôge as in "swakke" soarte. Dat is in wichtich karakteristyk om te begripen oer jo analyten, om't it sil bepale hokker type SPE-media te brûken. Yn algemiene termen, tinken oer tsjinstellingen dy't tegearre sille helpe hjir. It is oan te rieden om in swak ion-útwikseling SPE-sorbint te koppelen mei in "sterke" soarte en in sterke ion-útwikseling-sorbint mei in "swak" analyt.