De skieding en suvering fan aaiwiten wurdt in protte brûkt yn biogemy ûndersyk en tapassing en is in wichtige operasjonele feardigens. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument hat gearstald de rûge skieding en fyn skieding ynhâld fanproteïnesuvering foar elkenien. In typyske eukaryotyske sel kin tûzenen ferskillende aaiwiten befetsje, guon binne tige ryk en guon befetsje mar in pear eksimplaren. Om in bepaald aaiwyt te studearjen, is it needsaaklik om it aaiwyt earst te suverjen fan oare aaiwiten en net-proteinmolekulen.
Grutte skieding
As it aaiwyt-ekstrakt (soms mingd mei nukleïnesoeren, polysaccharides, ensfh.) wurdt krigen, wurdt in set fan passende metoaden selektearre om de winske te skiedenproteïnefan oare ûnreinheden. Yn 't algemien brûkt dizze stap fan skieding metoaden lykas salting, isoelektryske puntakkumulaasje en organyske solventfraksjonering. Dizze metoaden wurde karakterisearre troch ienfâld en grutte ferwurkingskapasiteit, dy't in protte ûnreinheden kinne ferwiderje en de proteinoplossing konsintrearje. Guon proteïne-ekstrakten binne grut yn folume en binne net geskikt foar konsintraasje troch akkumulaasje of útsalting. Jo kinne kieze foar ultrafiltraasje, gelfiltraasje, frije fakuümdrogen of oare metoaden foar konsintraasje.
Fijne skieding
Nei de rûge fractionation fan it stekproef, it folume is oer it algemien lyts, en de measte ûnreinheden binne fuortsmiten. Foar fierdere suvering omfetsje chromatografyske metoaden oer it generaal gelfiltraasje, ionútwikselingchromatografy, adsorpsjonschromatografy, en affiniteitschromatografy. As it nedich is, kinne jo ek kieze electrophoresis, ynklusyf sône electrophoresis, isoelectric punt set, ensfh as de lêste suvering proses. De metoade brûkt foar ûnderferdieling nivo skieding is oer it algemien lyts yn planning, mar mei hege resolúsje.
Kristallisaasje is it lêste proses fan proteïneskieding en suvering. Hoewol it kristallisaasjeproses net soarget dat it aaiwyt unifoarm wêze moat, is it allinich as in bepaald aaiwyt in foardiel hat yn 'e oplossing om in kristal te foarmjen. It kristallisaasjeproses sels wurdt begelaat troch in bepaalde graad fan suvering, en rekristallisaasje kin in lyts bedrach fan ferwurke proteïne fuortsmite. Sûnt denaturedproteïneis nea fûn tidens it kristallisaasjeproses, proteinkristallisaasje is net allinich in teken fan suverens, mar ek in krêftige rjochtline om te bepalen dat it produkt yn syn natuerlike steat is.
Posttiid: Nov-19-2020