Nucleic acid is ferdield yn deoxyribonucleic acid (DNA) en ribonucleic acid (RNA), wêrby't RNA ûnderferdield wurde kin yn ribosomaal RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) en transfer RNA (tRNA) neffens ferskate funksjes.

DNA is benammen konsintrearre yn 'e kearn, mitochondria en chloroplasten, wylst RNA benammen ferspraat is yn it cytoplasma.

Om't purinebasen en pyrimidinebasen dûbele bannen yn nukleïnesoeren hawwe konjugearre, hawwe nukleïnesoeren de skaaimerken fan ultraviolet-absorption. De ultraviolet absorption fan DNA natrium sâlten is om 260nm, en syn absorption wurdt útdrukt as A260, en it is by de absorption trough by 230nm, dus ultraviolet spektroskopy kin brûkt wurde. Nucleic soeren wurde kwantitatyf en kwalitatyf bepaald troch in luminometer.

Nucleic soeren binne ampholytes, dy't lykweardich binne oan polyacids. Nucleic soeren kinne wurde dissociated yn anionen troch it brûken fan neutrale of alkaline buffers, en pleatst yn in elektrysk fjild om te bewegen nei de anode. Dit is it prinsipe fan elektroforese.

Prinsipes en easken foar nukleïnesûrwinning en suvering

1. Soargje foar de yntegriteit fan nucleic acid primêre struktuer

2. Eliminearje de fersmoarging fan oare molekulen (lykas it útsluten fan RNA-ynterferinsje by it ekstrahearjen fan DNA)

3. D'r moatte gjin organyske solvents en hege konsintraasjes fan metaalionen wêze dy't enzymen yn nukleïnesûrmonsters remme

4. Ferminderje makromolekulêre stoffen lykas aaiwiten, polysaccharides en lipiden safolle mooglik

Nucleic acid ekstraksje en suvering metoade

1. Fenol / chloroform ekstraksje metoade

It waard útfûn yn 1956. Nei it behanneljen fan de sel brutsen flüssigens of weefselhomogenaat mei fenol/chloroform, wurde de nukleïnesoerekomponinten, benammen DNA, oplost yn 'e wetterige faze, lipiden binne benammen yn' e organyske faze, en aaiwiten lizze tusken de twa fazen.

2. Alkohol delslach

Ethanol kin de hydrataasjelaach fan nukleïnesûr eliminearje en de negatyf laden fosfaatgroep bleatstelle, en posityf laden ioanen lykas NA﹢ kinne kombinearje mei de fosfaatgroep om in delslach te foarmjen.

3. Chromatography kolom metoade

Troch it spesjale silika-basearre adsorpsjemateriaal kin DNA spesifyk wurde adsorbearre, wylst RNA en proteïne soepel troch kinne passe, en dan hege sâlt en lege pH brûke om nukleïnesûr te binen, en eluere mei leech sâlt en hege pH om nukleïne te skieden en te suverjen soer.

4. Termyske kraken alkalimetoade

Alkaline-ekstraksje brûkt benammen de topologyske ferskillen tusken kovalent sletten sirkulêre plasmiden en lineêre chromatine om se te skieden. Under alkaline omstannichheden binne denaturearre aaiwiten oplosber.

5. Siedende pyrolyse metoade

De DNA-oplossing wurdt waarmbehannele om te profitearjen fan 'e eigenskippen fan lineêre DNA-molekulen om DNA-fragminten te skieden fan it delslach dat wurdt foarme troch denaturearre aaiwiten en sellulêre ôffal troch sintrifugaasje.

6. Nanomagnetyske kralen metoade

Mei help fan nanotechnology om it oerflak fan superparamagnetyske nanopartikels te ferbetterjen en te feroarjen, wurde superparamagnetyske silisiumokside nano-magnetyske kralen taret. De magnetyske kralen kinne spesifyk werkenne en effisjint bine oan nukleïnesûrmolekulen op in mikroskopyske ynterface. Mei help fan de superparamagnetyske eigenskippen fan silica nanospheres, ûnder de aksje fan Chaotropic sâlten (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, ensfh) en in ekstern magnetysk fjild, DNA en RNA waarden isolearre út bloed, dier weefsel, iten, pathogene mikroorganismen en oare samples.