La séparation et la purification des protéines sont largement utilisées dans la recherche et les applications en biochimie et constituent une compétence opérationnelle importante. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument a compilé la teneur en séparation brute et en séparation fine deprotéinepurification pour tous. Une cellule eucaryote typique peut contenir des milliers de protéines différentes, certaines sont très riches et d’autres n’en contiennent que quelques copies. Afin d’étudier une certaine protéine, il est nécessaire de d’abord purifier la protéine d’autres protéines et molécules non protéiques.

Séparation grossière

Lorsque l'extrait protéique (parfois mélangé à des acides nucléiques, des polysaccharides, etc.) est obtenu, un ensemble de méthodes appropriées est sélectionné pour séparer lesprotéinedes autres impuretés. Généralement, cette étape de séparation utilise des méthodes telles que le relargage, l'accumulation de points isoélectriques et le fractionnement des solvants organiques. Ces méthodes se caractérisent par leur simplicité et leur grande capacité de traitement, qui peuvent éliminer de nombreuses impuretés et concentrer la solution protéique. Certains extraits de protéines sont volumineux et ne conviennent pas à la concentration par accumulation ou par relargage. Vous pouvez choisir l’ultrafiltration, la filtration sur gel, le séchage par congélation sous vide ou d’autres méthodes de concentration.

Séparation fine

Après le fractionnement grossier de l’échantillon, le volume est généralement faible et la plupart des impuretés ont été éliminées. Pour une purification plus poussée, les méthodes de chromatographie comprennent généralement la filtration sur gel, la chromatographie par échange d'ions, la chromatographie d'adsorption et la chromatographie d'affinité. Si nécessaire, vous pouvez également choisir l'électrophorèse, y compris l'électrophorèse de zone, le réglage du point isoélectrique, etc. comme processus de purification final. La méthode utilisée pour la séparation des niveaux de subdivision est généralement de petite taille en termes de planification, mais avec une haute résolution.

La cristallisation est le processus final de séparation et de purification des protéines. Bien que le processus de cristallisation ne garantisse pas que la protéine doit être uniforme, ce n'est que lorsqu'une certaine protéine a un avantage dans la solution pour former un cristal. Le processus de cristallisation lui-même s'accompagne d'un certain degré de purification et la recristallisation peut éliminer une petite quantité de protéine frelatée. Depuis dénaturéprotéinen'a jamais été trouvée au cours du processus de cristallisation, la cristallisation des protéines n'est pas seulement un signe de pureté, mais aussi une ligne directrice puissante pour déterminer que le produit est dans son état naturel.