جداسازی و خالص سازی پروتئین ها به طور گسترده در تحقیقات و کاربردهای بیوشیمی استفاده می شود و یک مهارت عملیاتی مهم است. SCG Protein Purification System-Saipu Instrument شرکت Saipu Instrument جداسازی خام و جداسازی ریز را گردآوری کرده است.پروتئینتطهیر برای همه یک سلول یوکاریوتی معمولی می تواند حاوی هزاران پروتئین مختلف باشد، برخی از آنها بسیار غنی هستند و برخی فقط حاوی چند نسخه هستند. برای مطالعه یک پروتئین خاص، ابتدا باید پروتئین را از سایر پروتئین ها و مولکول های غیر پروتئینی خالص کرد.

جداسازی درشت

هنگامی که عصاره پروتئین (گاهی با اسیدهای نوکلئیک، پلی ساکاریدها و غیره مخلوط می شود) به دست می آید، مجموعه ای از روش های مناسب برای جداسازی مورد نظر انتخاب می شود.پروتئیناز سایر ناخالصی ها به طور کلی، در این مرحله جداسازی از روش هایی مانند نمک زدایی، تجمع نقطه ایزوالکتریک و شکنش با حلال آلی استفاده می شود. این روش ها با سادگی و ظرفیت پردازش زیاد مشخص می شوند که می تواند بسیاری از ناخالصی ها را حذف کرده و محلول پروتئین را غلیظ کند. برخی از عصاره های پروتئینی حجم زیادی دارند و برای تغلیظ از طریق تجمع یا نمک زدن مناسب نیستند. شما می توانید اولترافیلتراسیون، فیلتراسیون ژل، خشک کردن خلاء انجمادی یا روش های دیگر را برای غلظت انتخاب کنید.

جداسازی خوب

پس از تکه تکه شدن خشن نمونه، حجم به طور کلی کم است و بیشتر ناخالصی ها حذف شده اند. برای خالص‌سازی بیشتر، روش‌های کروماتوگرافی عموماً شامل فیلتراسیون ژل، کروماتوگرافی تبادل یونی، کروماتوگرافی جذبی و کروماتوگرافی میل ترکیبی است. در صورت لزوم، می توانید الکتروفورز شامل الکتروفورز ناحیه، مجموعه نقطه ایزوالکتریک و غیره را نیز به عنوان فرآیند تصفیه نهایی انتخاب کنید. روش مورد استفاده برای جداسازی سطح زیربخش معمولاً در برنامه ریزی کوچک است، اما با وضوح بالا.

کریستالیزاسیون فرآیند نهایی جداسازی و خالص سازی پروتئین است. اگرچه فرآیند کریستالیزاسیون تضمین نمی کند که پروتئین باید یکنواخت باشد، اما تنها زمانی است که پروتئین خاصی در محلول مزیتی برای تشکیل کریستال داشته باشد. فرآیند کریستالیزاسیون خود با درجه خاصی از خالص سازی همراه است و تبلور مجدد می تواند مقدار کمی از پروتئین تقلبی را حذف کند. از آنجایی که دناتوره شده استپروتئینهرگز در طول فرآیند کریستالیزاسیون یافت نشد، کریستالیزاسیون پروتئین نه تنها نشانه خلوص است، بلکه یک دستورالعمل قدرتمند برای تعیین اینکه محصول در حالت طبیعی خود است.