Zein da arazteko metodoaproteinak arazteko sistema? Beharrezkoa da araztutako proteinaren DNA-sekuentzia kodetzailea ezagutzea, xede-genean zein zelula edo ehun dauden gainespresatzen den ikusteko eta gene-abiarazleak diseinatzea xede-DNA zatiaren arf-a anplifikatzeko. Xede gene-zatiak eskuratzea deritzona da.
Adierazpen-bektorearen eraikuntza: Lortutako gene-adierazpenaren beraren ezaugarriak dituen espresio-bektore prokarioto edo eukariotoan, urrats honen arazo nagusia plasmidoa eta interesa duen genea, eta adierazpen-sistema eraikitzea da. Adierazpen prokariotoaren denbora laburra da, kostua baxua eta espresio kopuru handia lehentasuna da; genea ez da E. coli-n adierazten, eta arazoa kodoien optimizazioan gertatzen da. Proteinaren jarduera eta arazketa hobea kontuan hartuta, ikertzaileek Pichi legamian adieraztea aukeratu zuten. Kodoiaren optimizazioaren adierazpen arrakastatsua garrantzitsua da.
Zein da proteinak arazteko sistemaren arazteko metodoa:
1. Prezipitazioak.
2. Elektroforesia: kargatutako proteina bat bere puntu isoelektrikoa baino altuagoa edo baxuagoa da eta eremu elektrikoko elektrodo negatibora edo eremu elektrikoko elektrodo positirrera eraman daiteke. Laguntza film elektroforesia, elektroforesia, etab.
3. Dialisia: molekula handiak proteinetatik eta konposatu organiko molekular txikietatik bereizteko bi dialisi-poltsa erabiltzen dituen metodoa.
4. Kromatografia: Ioi-trukearen kromatografiak proteinen propietate askeak erabiltzen ditu. pH zehatz batean, proteinen kargak eta propietateak desberdinak dira, eta ioi-truke kromatografia bidez bereiz daitezke. Anion truke kromatografian, potentzia negatibo txikia duten proteinak eluitzen dira lehenik. Bahe molekularrak, gel-iragazkia izenez ere ezagunak. Proteina txikiak poroetan sartzen dira eta denbora luzez geratzen dira. Proteina handiak ezin dira poroetan sartu eta zuzenean irten.
5. Zein da arazte-metodoaproteinak arazteko sistema? Ultrazentrifazioa: Proteinen arazketa erabil daiteke pisu molekularra zehazteko eta proteina gisa erabil daiteke. Dentsitate ezberdineko proteinen eraketa bereizten da.
Argitalpenaren ordua: 2021-04-21