SPE hamarkadetan egon da, eta arrazoi onengatik. Zientzialariek beren laginetatik atzeko osagaiak kendu nahi dituztenean, hori egiteko erronkari aurre egiten diote interesgarri den konposatuaren presentzia eta kantitatea zehaztasunez eta zehaztasunez zehazteko duten gaitasuna murriztu gabe. SPE zientzialariek sarritan erabiltzen duten teknika bat da laginak prestatzen laguntzeko analisi kuantitatiboetarako erabiltzen den tresneria sentikorra. SPE sendoa da, lagin mota askotarako funtzionatzen du eta SPE produktu eta metodo berriak garatzen jarraitzen dute. Metodo horiek garatzearen oinarrian teknikaren izenean "kromatografia" hitza agertzen ez den arren, SPE bereizketa kromatografikoaren forma bat da.

SPE: Kromatografia Isila

Esaera zahar bat dago "zuhaitz bat baso batean erortzen bada eta inor ez badago hori entzuteko, soinurik egiten al du oraindik?" Esaera horrek SPE gogorarazten digu. Arraroa dirudi hori esatea, baina SPEn pentsatzen dugunean galdera hauxe da: "banaketa bat gertatzen bada eta han grabatzeko detektagailurik ez badago, benetan gertatu al da kromatografia?" SPEren kasuan, erantzuna "bai!" SPE metodo bat garatzen edo konpontzen denean, oso lagungarria izan daiteke SPE kromatogramarik gabeko kromatografia besterik ez dela gogoratzea. Pentsatzen duzunean, Mikhail Tsvet, “kromatografiaren aita” bezala ezagutzen dena, ez al zen gaur egun “SPE” deituko genukeena egiten? Landare-pigmentuen nahasketak bereizi zituenean grabitateak garraiatzen utziz, disolbatzaile batean disolbatuta, klarion-ohe baten bidez, horren ezberdina al zen SPE metodo moderno bat baino?

Zure lagina ulertzea

SPE printzipio kromatografikoetan oinarritzen denez, SPE metodo on bakoitzaren oinarrian analitoen, matrizearen, fase geldikorraren (SPE xurgatzailea) eta fase mugikorren (lagina garbitzeko edo elutatzeko erabiltzen diren disolbatzaileak) arteko erlazioa dago. .

Zure laginaren izaera ahalik eta gehien ulertzea da hasteko lekurik onena SPE metodo bat garatu edo konpondu behar baduzu. Metodoaren garapenean beharrezkoak ez diren saiakuntzak eta akatsak saihesteko, zure analitoen eta matrizearen propietate fisiko eta kimikoen deskribapenak oso lagungarriak dira. Zure lagina ezagutzen duzunean, egoera hobean egongo zara lagin hori SPE produktu egoki batekin lotzeko. Esate baterako, analitoen polaritate erlatiboa elkarren eta matrizearen aldean jakiteak lagun zaitzake erabakitzen baduzu polaritatea erabiltzea analitoak matrizetik bereizteko ikuspegi egokia den. Zure analitoak neutroak diren edo karga-egoeretan egon daitezkeen jakiteak neutroak, positiboki kargatuak edo negatiboki kargatutako espezieak atxikitzen edo elutzean espezializatutako SPE produktuetara bideratzen lagun zaitzake. Bi kontzeptu hauek SPE metodoak garatzean eta SPE produktuak hautatzean aprobetxatzeko gehien erabiltzen diren analitoen propietateetako bi adierazten dituzte. Zure analitoak eta matrizearen osagai nabarmenak termino hauetan deskriba ditzakezu, zure SPE metodoaren garapenerako norabide ona hartzeko bidean zaude.

Afinitatez bereiztea

LC zutabe baten barruan gertatzen diren bereizketak definitzen dituzten printzipioak, adibidez, jokoan daude SPE bereizketa batean. Edozein bereizketa kromatografikoren oinarria laginaren osagaien eta zutabe edo SPE kartutxoan dauden bi faseen artean, fase mugikorra eta fase geldikorraren artean, elkarrekintza maila desberdinak dituen sistema bat ezartzea da.

SPE metodoaren garapenarekin eroso sentitzeko lehen urratsetako bat SPE bereizketan erabiltzen diren bi elkarrekintza-motak ezagutzea da: polaritatea eta/edo karga-egoera.

Polaritatea

Polaritatea erabiliko baduzu zure lagina garbitzeko, egin behar duzun lehen aukeretako bat "modu" egokiena zein den erabakitzea da. Hobe da SPE euskarri nahiko polar batekin eta fase mugikor nahiko ez-polar batekin lan egitea (hau da, modu normala) edo alderantziz, SPE euskarri nahiko ez-polar batekin fase mugikor nahiko polar batekin akoplatuta (hau da, alderantzizko modua, horrela deitzen dena kontrakoa delako. hasieran ezarritako “modu normala”rena).

SPE produktuak arakatzen dituzun bitartean, SPE faseak polaritate-sorta batean daudela ikusiko duzu. Gainera, fase mugikorraren disolbatzailea aukeratzeak polaritate sorta zabala ere eskaintzen du, sarritan oso sintonizagarriak disolbatzaileen, bufferen edo bestelako gehigarrien nahasteen bidez. Fintasun-maila handia dago zure analitoak matrizearen interferentziaetatik (edo elkarrengandik) bereizteko ustiatu beharreko ezaugarri nagusi gisa polaritate-diferentziak erabiltzean.

Kontuan izan kimikako esaera zaharra "bezala disolbatzen da" polaritatea bereizteko gidari gisa hartzen ari zarenean. Zenbat eta antzekoagoa izan konposatu bat fase mugikor edo geldiko baten polaritatearekin, orduan eta aukera handiagoa izango da elkarrekintza sendoagoa izateko. Fase geldialdiarekin interakzio indartsuagoek atxikipen luzeagoak eragiten dituzte SPE medioan. Fase mugikorrarekiko interakzio sendoek atxikipen gutxiago eta eluzio goiztiarra eragiten dute.

Karga-egoera

Interesgarri diren analitoak beti egoera kargatuan badaude edo disolbatzen diren disoluzioaren baldintzen arabera egoera kargatuan jartzeko gai badira (adibidez pH), orduan matrizetik (edo bakoitza beste batzuk) beren kargu batekin erakar ditzaketen SPE hedabideen bidez.

Kasu honetan, erakarpen elektrostatikoen arau klasikoak aplikatzen dira. Polaritate-ezaugarrietan oinarritzen diren bereizketek eta elkarreragin-ereduak "antzekoak disolbatzen ditu" ereduak ez bezala, egoera kargatuek "kontrakoek erakartzen" arauaren arabera funtzionatzen dute. Esaterako, baliteke bere gainazalean karga positiboa duen SPE medio bat izatea. Positiboki kargatutako gainazal hori orekatzeko, normalean negatiboki kargatutako espezie bat (anioi bat) egon ohi da hari lotuta. Zure negatiboki kargatutako analitoa sisteman sartzen bada, hasieran loturiko anioia desplazatzeko eta positiboki kargatutako SPE gainazalarekin elkarreragiteko gaitasuna du. Horren ondorioz, analitoa SPE fasean atxikitzen da. Anioien truke honi "Anion Exchange" deitzen zaio eta "Ion Exchange" SPE produktuen kategoria zabalagoaren adibide bat besterik ez da. Adibide honetan, positiboki kargatutako espezieek fase mugikorrean geratzeko eta positiboki kargatutako SPE gainazalarekin elkarreragiteko pizgarri handia izango lukete, beraz, ez lirateke mantenduko. Eta, SPE gainazalak bere ioi-trukearen propietateez gain beste ezaugarririk izan ezean, espezie neutroak ere gutxien mantenduko lirateke (nahastutako SPE produktuak existitzen badira ere, SPE medio berean ioi-trukea eta fase alderantzizko atxikipen-mekanismoak erabiltzeko aukera ematen dutenak). ).

Ioi-truke mekanismoak erabiltzean kontuan izan beharreko bereizketa garrantzitsu bat analitoaren karga-egoeraren izaera da. Analitoa beti kargatuta badago, dagoen disoluzioaren pH edozein dela ere, espezie "sendo"tzat hartzen da. Analitoa pH baldintza jakin batzuetan bakarrik kargatzen bada, espezie "ahul"tzat hartzen da. Hori zure analitoei buruz ulertzeko ezaugarri garrantzitsua da, zer SPE euskarri mota erabili erabakiko duelako. Orokorrean, kontrakoak elkarrekin joatea pentsatzeak lagunduko du hemen. Komeni da ioi-truke ahuleko SPE sorbente bat espezie "indartsu" batekin eta ioi-truke-sorbente indartsu bat analito "ahul" batekin parekatzea.