Proteinen arazketa zakarra eta bereizketa fina

Proteinen bereizketa eta arazketa asko erabiltzen da biokimika ikerketan eta aplikazioan eta trebetasun operatibo garrantzitsua da. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument-en bereizketa gordina eta bereizketa finaren edukia bildu duproteinadenontzako garbiketa. Zelula eukarioto tipiko batek milaka proteina ezberdin izan ditzake, batzuk oso aberatsak dira eta beste batzuk kopia gutxi batzuk baino ez dituzte. Proteina jakin bat aztertzeko, beharrezkoa da lehenik proteina beste proteina eta proteina ez diren molekula batzuetatik arazteko.

19

Banaketa lodia

Proteina-estraktua (batzuetan azido nukleikoekin, polisakaridoekin, etab. nahastuta) lortzen denean, metodo egokien multzoa hautatzen da nahi dena bereizteko.proteinabeste ezpurutasun batzuetatik. Orokorrean, bereizketa-urrats honek gatzatzea, puntu isoelektrikoa metatzea eta disolbatzaile organikoa zatikatzea bezalako metodoak erabiltzen ditu. Metodo hauek sinpletasuna eta prozesatzeko ahalmen handia dute, eta horrek ezpurutasun asko kendu eta proteina-soluzioa kontzentratu dezake. Proteina-estraktu batzuk bolumen handikoak dira eta ez dira egokiak metaketa edo gatz bidez kontzentratzeko. Ultrairagazkia, gel iragazkia, izozte hutsean lehortzea edo kontzentraziorako beste metodo batzuk aukeratu ditzakezu.

Banaketa fina

Laginaren zatiketa zakarra egin ondoren, bolumena, oro har, txikia da, eta ezpurutasun gehienak kendu egin dira. Arazketa gehiago lortzeko, kromatografia-metodoek, oro har, gel-iragazkia, ioi-trukearen kromatografia, adsortzio-kromatografia eta afinitate-kromatografia dira. Beharrezkoa izanez gero, elektroforesia ere aukeratu dezakezu, zona elektroforesia, puntu isoelektriko multzoa eta abar barne, azken arazketa-prozesu gisa. Zatiketa-maila bereizteko erabiltzen den metodoa, oro har, txikia da plangintzan, baina bereizmen handikoa.

Kristalizazioa proteinak bereizteko eta arazteko azken prozesua da. Kristalizazio-prozesuak proteinak uniformea ​​izan behar duenik ziurtatzen ez badu ere, proteina jakin batek disoluzioan abantaila duen kristal bat osatzeko bakarrik gertatzen da. Kristalizazio-prozesua bera arazte-maila jakin batekin batera dator, eta birkristalizazioak proteina adulteratu kopuru txiki bat kendu dezake. DesnaturalizatutaproteinaKristalizazio-prozesuan ez da inoiz aurkitu, proteina-kristalizazioa garbitasunaren seinalea ez ezik, produktua bere egoera naturalean dagoela zehazteko jarraibide indartsua ere bada.


Argitalpenaren ordua: 2020-11-19