Proteinen bereizketa eta arazketa asko erabiltzen da biokimika ikerketan eta aplikazioan eta trebetasun operatibo garrantzitsua da. Zelula eukarioto tipiko batek milaka proteina ezberdin izan ditzake, batzuk oso aberatsak dira eta beste batzuk kopia gutxi batzuk baino ez dituzte. jakin bat aztertzekoproteina, beharrezkoa da lehenik proteina beste proteina batzuetatik eta proteina ez diren molekulaetatik arazteko.

1. Gatzatzeko metodoaproteina:

Gatz neutroak eragin handia du proteinen disolbagarritasunean. Orokorrean, gatz-kontzentrazioa handitzen denean gatz-kontzentrazio baxuan, proteinen disolbagarritasuna handitzen da. Horri gatzatzea deitzen zaio; gatz-kontzentrazioa handitzen jarraitzen denean, Proteinen disolbagarritasuna maila desberdinetan murrizten da eta bata bestearen atzetik bereizten da. Fenomeno honi gatzatzea deitzen zaio.

2. Puntu isoelektrikoak pilatzeko metodoa:

Partikulen arteko aldaratze elektrostatikoa proteina estatikoa denean txikiena da, beraz, disolbagarritasuna ere txikiena da. Hainbat proteinaren puntu isoelektrikoak desberdinak dira. Egokitze-disoluzioaren pH-a proteina baten puntu isoelektrikora heltzeko erabil daiteke Metatu egin, baina metodo hau oso gutxitan erabiltzen da bakarrik eta gatzatzeko metodoarekin konbina daiteke.

3.Dialisia eta ultrairagazkia:

Dialisiak mintz erdi-iragazkorra erabiltzen du tamaina molekular ezberdinetako proteinak bereizteko. Ultrairagazte-metodoak presio altua edo indar zentrifugoa erabiltzen du ura eta beste solutu molekula txiki batzuk mintz erdi-iragazkor batetik igaro daitezen,proteinamintzean geratzen da. Poro tamaina desberdinak hauta ditzakezu pisu molekular ezberdineko proteinak atzemateko.

4.Gel iragazteko metodoa:

Tamaina baztertzeko kromatografia edo bahe molekularreko kromatografia ere deitzen zaio, proteina nahasketak tamaina molekularraren arabera bereizteko metodorik erabilgarrienetako bat da. Zutabean ontziratzeko gehien erabiltzen diren materialak glukosa gel (Sephadex ged) eta agarosa gel (agarosa gel) dira.

5. Elektroforesia:

pH baldintza berean, hainbat proteina bereiz daitezke eremu elektrikoan duten pisu molekular eta karga ezberdinengatik. Merezi du arreta jartzea multzo isoelektrikoko elektroforesiari, zeinak anfolito bat erabiltzen baitu eramaile gisa. Elektroforesian, anfolitoak elektrodo positibotik elektrodo negatibora pixkanaka gehitzen den pH gradiente bat osatzen du. Karga jakin bat duen proteinak bertan igeri egiten duenean, elkarri helduko zaio. Puntu elektrikoaren pH-ko posizioa etena da, eta metodo hau hainbat proteina aztertzeko eta prestatzeko erabil daiteke.

6.Ion komunikazio kromatografia:

ioi-komunikazio-agenteek komunikazio-agente katioikoak (adibidez, karboximetil zelulosa; CM-zelulosa) eta komunikazio-agente anionikoak (dietilaminoetil zelulosa). Ioi-komunikazioko kromatografia zutabetik igarotzean, ioi-komunikazio-agentearen aurkako karga duen proteina ioi-komunikazio-agentean xurgatzen da, eta, ondoren, adsorbitua.proteinapH-a edo indar ionikoa aldatuz eluatzen da.

7.Afinitate kromatografia:

Afinitate-kromatografia proteinak bereizteko metodo oso erabilgarria da. Askotan urrats bakarra behar da proteina jakin bat garbitasun handiko proteina nahasketa nahasi batetik araztu behar den bereizteko.

Metodo hau zenbait proteina kobalente baino gehiago ligando izeneko beste molekula batekin lotura espezifikoan oinarritzen da (Ligando).

Oinarrizko printzipioa:

proteinak nahasketa nahasian daude ehunetan edo zeluletan, eta zelula mota bakoitzak milaka proteina ezberdin ditu. Horregatik, proteinen arteko bereizketa biokimikaren zati garrantzitsu bat da, eta ez da bakarrik izan. Edo prest egindako metodo multzo batek proteina nahasian nahasi batetik edozein proteina ken diezaioke, beraz, hainbat metodo konbinatuta erabiltzen dira askotan.