Valkude eraldamist ja puhastamist kasutatakse laialdaselt biokeemia uuringutes ja rakendustes ning see on oluline tööoskus. SCG valgu puhastussüsteemi ettevõte-Saipu Instrument on koostanud tooreralduse ja peeneralduse sisuvalkpuhastus kõigile. Tüüpiline eukarüootne rakk võib sisaldada tuhandeid erinevaid valke, mõned neist on väga rikkad ja mõned sisaldavad vaid mõnda koopiat. Teatud valgu uurimiseks on vaja valk esmalt puhastada teistest valkudest ja mittevalgulistest molekulidest.

Jäme eraldamine

Kui saadakse valguekstrakt (mõnikord segatuna nukleiinhapete, polüsahhariididega jne), valitakse sobivate meetodite komplekt soovitud ekstrakti eraldamiseks.valkmuudest lisanditest. Üldiselt kasutatakse selles eraldamisetapis selliseid meetodeid nagu väljasoolamine, isoelektrilise punkti akumulatsioon ja orgaanilise lahusti fraktsioneerimine. Neid meetodeid iseloomustab lihtsus ja suur töötlemisvõimsus, mis võimaldab eemaldada palju lisandeid ja kontsentreerida valgulahust. Mõned valguekstraktid on mahult suured ja ei sobi kontsentreerimiseks akumuleerimise või väljasoolamise teel. Kontsentreerimiseks saate valida ultrafiltratsiooni, geelfiltratsiooni, külmkuivatuskuivatuse või muud meetodid.

Peen eraldamine

Pärast proovi töötlemata fraktsioneerimist on selle maht üldiselt väike ja suurem osa lisanditest on eemaldatud. Edasiseks puhastamiseks hõlmavad kromatograafiameetodid üldiselt geelfiltratsiooni, ioonvahetuskromatograafiat, adsorptsioonkromatograafiat ja afiinsuskromatograafiat. Vajadusel saab lõplikuks puhastusprotsessiks valida ka elektroforeesi, sh tsoonielektroforeesi, isoelektriliste punktide komplekti jne. Alajaotuse tasandi eraldamiseks kasutatav meetod on planeerimisel üldiselt väike, kuid kõrge eraldusvõimega.

Kristalliseerimine on valkude eraldamise ja puhastamise viimane protsess. Kuigi kristallisatsiooniprotsess ei taga, et valk peab olema ühtlane, on see ainult siis, kui teatud valgul on lahuses eelis kristallide moodustamisel. Kristalliseerimisprotsessiga kaasneb teatav puhastusaste ja ümberkristallimine võib eemaldada väikese koguse võltsitud valku. Alates denatureerimisestvalkei ole kunagi leitud kristalliseerimisprotsessi käigus, valgu kristalliseerumine ei ole mitte ainult puhtuse märk, vaid ka võimas juhis toote loomuliku oleku kindlakstegemiseks.