¿Cuál es el método de purificación delsistema de purificación de proteínas? Es necesario conocer la secuencia de ADN codificante de la proteína purificada, ver qué células o tejidos están sobreexpresados ​​en el gen diana y diseñar cebadores genéticos para amplificar el arf del fragmento de ADN diana. Ésta es la llamada adquisición de fragmentos de genes diana.

Construcción del vector de expresión: En el vector de expresión procariótico o eucariota con las características de la propia expresión génica obtenida, el principal problema de este paso es construir el plásmido y el gen de interés, y el sistema de expresión. El tiempo de expresión procariótica es corto, el costo es bajo y una gran cantidad de expresión es una prioridad; el gen no se expresa en E. coli y el problema ocurre en la optimización de codones. En consideración a una mejor actividad y purificación de la proteína, los investigadores optaron por expresarla en levadura Pichi. La expresión exitosa de la optimización de codones es importante.

¿Cuál es el método de purificación del sistema de purificación de proteínas?

1. Precipitación.

2. Electroforesis: una proteína cargada es superior o inferior a su punto isoeléctrico y puede moverse al electrodo negativo o al electrodo positivo del campo eléctrico en el campo eléctrico. Electroforesis de película de soporte, electroforesis, etc.

3. Diálisis: método que utiliza dos bolsas de diálisis para separar moléculas grandes de proteínas y compuestos orgánicos moleculares pequeños.

4. Cromatografía: La cromatografía de intercambio iónico utiliza las propiedades libres de las proteínas. Bajo un pH específico, las cargas y propiedades de las proteínas son diferentes y pueden separarse mediante cromatografía de intercambio iónico. En la cromatografía de intercambio aniónico, primero se eluyen las proteínas con bajo poder negativo. Tamices moleculares, también conocidos como filtración en gel. Pequeñas proteínas entran en los poros y permanecen en ellos durante mucho tiempo. Las proteínas grandes no pueden entrar en los poros y salir directamente.

5. ¿Cuál es el método de purificación delsistema de purificación de proteínas? Ultracentrifugación: la purificación de proteínas se puede utilizar para determinar el peso molecular y se puede utilizar como proteína. Se separa la formación de proteínas con diferentes densidades.