La separación y purificación de proteínas se utiliza ampliamente en la investigación y aplicación de la bioquímica y es una habilidad operativa importante. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ha compilado el contenido de separación de crudo y separación fina deproteínapurificación para todos. Una célula eucariota típica puede contener miles de proteínas diferentes, algunas son muy ricas y otras contienen sólo unas pocas copias. Para estudiar una determinada proteína, primero es necesario purificarla de otras proteínas y moléculas no proteicas.

Separación gruesa

Cuando se obtiene el extracto proteico (a veces mezclado con ácidos nucleicos, polisacáridos, etc.), se selecciona un conjunto de métodos apropiados para separar el extracto deseado.proteínade otras impurezas. Generalmente, este paso de separación utiliza métodos como sal, acumulación de punto isoeléctrico y fraccionamiento de disolventes orgánicos. Estos métodos se caracterizan por su simplicidad y gran capacidad de procesamiento, que pueden eliminar muchas impurezas y concentrar la solución de proteínas. Algunos extractos de proteínas tienen un gran volumen y no son adecuados para la concentración por acumulación o salazón. Puede elegir ultrafiltración, filtración en gel, secado por congelación al vacío u otros métodos de concentración.

Separación fina

Después del fraccionamiento aproximado de la muestra, el volumen es generalmente pequeño y se han eliminado la mayoría de las impurezas. Para una purificación adicional, los métodos de cromatografía generalmente incluyen filtración en gel, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de adsorción y cromatografía de afinidad. Si es necesario, también puede elegir la electroforesis, incluida la electroforesis de zona, el ajuste del punto isoeléctrico, etc., como proceso de purificación final. El método utilizado para la separación de niveles de subdivisión es generalmente pequeño en la planificación, pero con alta resolución.

La cristalización es el proceso final de separación y purificación de proteínas. Aunque el proceso de cristalización no asegura que la proteína deba ser uniforme, es sólo cuando una determinada proteína tiene ventaja en la solución para formar un cristal. El proceso de cristalización en sí va acompañado de un cierto grado de purificación y la recristalización puede eliminar una pequeña cantidad de proteína adulterada. desde desnaturalizadoproteínanunca se ha encontrado durante el proceso de cristalización, la cristalización de proteínas no es sólo un signo de pureza, sino también una poderosa pauta para determinar que el producto se encuentra en su estado natural.