Métodos y purificación de la purificación de proteínas.

Métodos depurificación de proteínas:

El método de purificación de proteínas, separación y purificación de proteínas, la proteína se libera de las células o tejidos originales en un estado disuelto y permanece en el estado natural original sin pérdida de actividad biológica. Por esta razón, el material debe eliminar el tejido animal y adiposo, el material de la semilla debe incluso eliminar la contaminación de la cubierta de la semilla por sustancias como los taninos, y en la semilla oleaginosa se debe utilizar preferentemente un disolvente orgánico de bajo punto de ebullición.

1. El método de purificación de proteínas, el tamaño y los diferentes métodos de análisis de separación: la diálisis y la ultrafiltración utilizan estas proteínas para atravesar la naturaleza de moléculas que no pueden atravesar la membrana semipermeable; Centrifugación en gradiente de densidad La calidad y densidad de la proteína en el medio tendrán un mayor impacto en las partículas. La velocidad de asentamiento es más rápida; La filtración en gel es un tipo de cromatografía en columna.

2. Separación de la diferencia de solubilidad en uso: electroprecipitación porque la carga neta de las moléculas de proteínas está en el punto isoeléctrico cero, lo que reduce la repulsión electrostática entre moléculas, es fácil de agregar y tiene una solubilidad mínima; solución salina utilizada con solución salina La concentración aumenta o disminuye la solubilidad de la proteína.

3. La carga se separa y analiza mediante diferentes métodos, los contenidos principales incluyen electroforesis y cromatografía de intercambio iónico.

4. Métodos depurificación de proteínasLa adsorción selectiva y la separación de proteínas utilizan la fuerza de la adsorción de partículas.

5. La cromatografía de afinidad se basa en la separación de ligandos. Esta característica biológica permite que las moléculas de proteínas se unan específicamente en lugar de covalentemente a otra molécula llamada ligando.

6. Método de purificación de proteínas: Método de precipitación con disolventes orgánicos a baja temperatura: utilice disolventes orgánicos que sean miscibles con agua, como metanol y etanol, para reducir la solubilidad y precipitación de la mayoría de las proteínas. Este método es mayor que la resolución de salado, pero la proteína se desnaturaliza más. Cuando es fácil, se debe realizar a baja temperatura.

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como purificarpurificación de proteínas:

Cómo purificar proteínas, la proteína es una molécula grande y varios tamaños moleculares de albúmina, existen algunos métodos más simples para separar proteínas y materiales de moléculas pequeñas, y también mezclas de proteínas separadas. Los principales métodos para separar proteínas de diferentes tamaños moleculares son la diálisis, la ultrafiltración, la filtración en gel y la separación centrífuga. La diálisis y la ultrafiltración se utilizan comúnmente en los métodos de separación de proteínas. La mezcla de diálisis que se va a separar se coloca en una bolsa de diálisis hecha de una membrana semipermeable y luego se sumerge en la solución de diálisis para su separación. La ultrafiltración es el proceso de pasar agua y otras moléculas pequeñas utilizando fuerza o presión centrífuga en una membrana semipermeable y atrapando proteínas en la membrana semipermeable. Estos dos métodos se pueden separar de las macromoléculas basadas en proteínas y de las moléculas pequeñas basadas en sales inorgánicas. A menudo se salan, se usan junto con el método de disolución de sal, o se pueden introducir para eliminar estos dos métodos después de salar usando soluciones de sales inorgánicas.

1. Cómo purificar proteínas mediante el método de salazón: La base del método de salazón es que la solubilidad de la proteína en una solución salina diluida aumentará con el aumento de la concentración de sal, pero cuando la concentración de sal aumenta hasta un cierto valor, la La actividad del agua aumentará. Disminución, lo que a su vez puede hacer que algunas proteínas generen cargas a través de la superficie de la estructura molecular para neutralizarse gradualmente y la membrana de hidratación se destruya gradualmente, lo que eventualmente puede causar que las proteínas y moléculas relacionadas desarrollen aglomeración y precipiten a partir de diferentes soluciones.

2. Método de precipitación con disolventes orgánicos: Hay dos razones para reducir la solubilidad de las proteínas en disolventes orgánicos: cómo purificar las proteínas como una solución salina con deshidratación; en segundo lugar, la constante dieléctrica de los disolventes orgánicos puede reducirse en comparación con el agua en los disolventes polares.

3. Agente precipitante de proteínas: la proteína como agente precipitante solo actúa sobre un tipo o uno de precipitación de proteínas, las más comunes son las alcalinas, proteicas, lectinas y metales pesados.

4. Precipitación de polietilenglicol: cómo purificar polímeros no iónicos solubles en agua parapurificación de proteínas, como polietilenglicol y sulfato de dextrano sódico para precipitar proteínas.


Hora de publicación: 27 de octubre de 2020
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