SPE ekzistas de jardekoj, kaj pro bona kialo. Kiam sciencistoj volas forigi fonkomponentojn de siaj specimenoj, ili alfrontas la defion fari tion sen redukti sian kapablon precize kaj precize determini la ĉeeston kaj kvanton de sia interesaĵo. SPE estas unu tekniko kiun sciencistoj ofte uzas por helpi prepari siajn provaĵojn por la sentema instrumentado uzita por kvanta analizo. SPE estas fortika, funkcias por larĝa aro de specimenaj tipoj, kaj novaj SPE-produktoj kaj metodoj daŭre estas evoluigitaj. Ĉe la koro de evoluigado de tiuj metodoj estas aprezo ke kvankam la vorto "kromatografio" ne aperas en la nomo de la tekniko, SPE estas tamen formo de kromatografia apartigo.

SPE: La Silenta Kromatografio

Estas malnova diro "se arbo falas en arbaron, kaj neniu estas ĉirkaŭe por aŭdi ĝin, ĉu ĝi ankoraŭ faras sonon?" Tiu diro memorigas nin pri SPE. Tio povus ŝajni strange diri, sed kiam ni pensas pri SPE, la demando fariĝas "se disiĝo okazas kaj ne ekzistas detektilo tie por registri ĝin, ĉu kromatografio vere okazis?" En la kazo de SPE, la respondo estas treege "jes!" Dum evoluigado aŭ solvi problemon de SPE-metodo, povas tre utile memori, ke SPE estas nur kromatografio sen la kromatogramo. Kiam vi pensas pri tio, ĉu Miĥail Cvet, konata kiel "la patro de kromatografio", ne faris tion, kion ni nomus "SPE" hodiaŭ? Kiam li apartigis siajn miksaĵojn de plantaj pigmentoj lasante graviton porti ilin, solvita en solvilo, tra lito de muelita kreto, ĉu ĝi estis tiom malsama ol moderna SPE-metodo?

Komprenante Vian Specimeno

Ĉar SPE estas bazita sur kromatografiaj principoj, ĉe la koro de ĉiu bona SPE-metodo estas la rilato inter la analitoj, la matrico, la senmova fazo (la SPE-sorbento), kaj la mova fazo (la solviloj uzitaj por lavi aŭ eligi la provaĵon) .

Kompreni la naturon de via specimeno kiel eble plej multe estas la plej bona loko por komenci se vi devas evoluigi aŭ solvi SPE-metodon. Por eviti nenecesan provon kaj eraron dum metodo-disvolviĝo, priskriboj de la fizikaj kaj kemiaj trajtoj de kaj viaj analitoj kaj la matrico estas tre helpemaj. Post kiam vi scias pri via specimeno, vi estos en pli bona pozicio por kongrui tiun specimenon kun taŭga SPE-produkto. Ekzemple, koni la relativan polusecon de la analitoj kompare unu kun la alia kaj la matrico povas helpi vin decidi ĉu uzi polusecon por apartigi analitojn de la matrico estas la ĝusta aliro. Scii ĉu viaj analitoj estas neŭtralaj aŭ povas ekzisti en ŝargitaj ŝtatoj ankaŭ povas helpi direkti vin al SPE-produktoj, kiuj specialiĝas pri reteni aŭ eluigajn neŭtralojn, pozitive ŝargitajn aŭ negative ŝargitajn speciojn. Ĉi tiuj du konceptoj reprezentas du el la plej ofte uzataj analittrajtoj por utiligi dum evoluigado de SPE-metodoj kaj elektado de SPE-produktoj. Se vi povas priskribi viajn analitojn kaj la elstarajn matrickomponentojn en ĉi tiuj terminoj, vi estas survoje elekti bonan direkton por via SPE-metoda evoluo.

Apartigo per Afineco

La principoj kiuj difinas la apartigojn kiuj okazas ene de LC-kolumno, ekzemple, ludas en SPE-apartigo. La fundamento de iu kromatografia apartigo estas establi sistemon kiu havas ŝanĝiĝantajn gradojn da interagado inter la komponentoj de la provaĵo kaj la du fazoj ĉeestantaj en kolono aŭ SPE-kartoĉo, la movebla fazo kaj la senmova fazo.

Unu el la unuaj paŝoj al sentiĝado komforta kun SPE-metodevoluo devas havi konaton kun la du plej ofte renkontitaj specoj de interagoj utiligitaj en SPE-apartigo: poluseco kaj/aŭ ŝargoŝtato.

Poluseco

Se vi uzos polusecon por purigi vian specimenon, unu el la unuaj elektoj, kiujn vi devas fari, estas decidi, kia "reĝimo" estas plej bona. Plej bone estas labori kun relative polusa SPE-medio kaj relative nepolusa movebla fazo (t.e. normala reĝimo) aŭ la malo, relative nepolusa SPE-medio kunligita kun relative polusa movebla fazo (t.e. inversigita reĝimo, tiel nomata nur ĉar ĝi estas la malo). de la komence establita "normala reĝimo").

Dum vi esploras SPE-produktojn, vi trovos, ke SPE-fazoj ekzistas en gamo da polusoj. Krome, la elekto de mova faza solvilo ankaŭ ofertas larĝan gamon de polusoj, ofte tre agordeblaj per la uzo de miksaĵoj de solviloj, bufroj aŭ aliaj aldonaĵoj. Estas granda grado de fajneco ebla kiam oni uzas polusajn diferencojn kiel la ŝlosilan karakterizaĵon por ekspluati por apartigi viajn analitojn de matricaj interferoj (aŭ unu de la alia).

Nur memoru la malnovan kemian adaĝon "kiel dissolvas kiel" kiam vi konsideras polusecon kiel la ŝoforon por apartigo. Ju pli simila kunmetaĵo estas al la poluseco de mova aŭ senmova fazo, des pli verŝajne ĝi interagas pli forte. Pli fortaj interagoj kun la senmova fazo kondukas al pli longaj retenoj sur la SPE-medio. Fortaj interagoj kun la mova fazo kondukas al malpli reteno kaj pli frua eluo.

Ŝargo Ŝtato

Se la analitoj de intereso aŭ ĉiam ekzistas en ŝargita stato aŭ povas esti metitaj en ŝargitan staton per la kondiĉoj de la solvaĵo en kiuj ili estas dissolvitaj (ekz. pH), tiam alia potenca rimedo por apartigi ilin de la matrico (aŭ ĉiu. aliaj) estas per la uzo de SPE-amaskomunikilaro, kiuj povas altiri ilin per propra pagendaĵo.

En ĉi tiu kazo, aplikas klasikaj elektrostatikaj altiraj reguloj. Male al disiĝoj kiuj dependas de poluseckarakterizaĵoj kaj la "kiel dissolvas kiel" modelo de interagoj, ŝargitaj ŝtatinteragoj funkcias laŭ la regulo de "kontraŭoj altiras." Ekzemple, vi eble havas SPE-medion, kiu havas pozitivan ŝargon sur sia surfaco. Por ekvilibrigi tiun pozitive ŝargitan surfacon, ekzistas tipe negative ŝargita specio (anjono) komence ligita al ĝi. Se via negative ŝargita analito estas enkondukita en la sistemon, ĝi havas la kapablon delokigi la komence ligitan anjonon kaj interagi kun la pozitive ŝargita SPE-surfaco. Tio rezultigas retenon de la analito sur la SPE-fazo. Ĉi tiu interŝanĝo de anjonoj nomiĝas "Anion Exchange" kaj estas nur unu ekzemplo de la pli larĝa kategorio de "Ion Exchange" SPE-produktoj. En ĉi tiu ekzemplo, pozitive ŝargitaj specioj havus fortan instigon resti en la mova fazo kaj ne interagi kun la pozitive ŝargita SPE-surfaco, tiel ke ili ne estus retenitaj. Kaj, krom se la SPE-surfaco havus aliajn karakterizaĵojn aldone al siaj interŝanĝaj trajtoj, neŭtralaj specioj ankaŭ estus minimume retenitaj (kvankam tiaj miksitaj SPE-produktoj ekzistas, permesante al vi utiligi ionŝanĝon kaj inversigan fazretenmekanismojn en la sama SPE-medio. ).

Grava distingo por konservi en menso dum utiligado de joninterŝanĝmekanismoj estas la naturo de la ŝargostato de la analito. Se la analito ĉiam estas ŝargita, sendepende de la pH de la solvo en kiu ĝi estas, ĝi estas konsiderita "forta" specio. Se la analito estas nur ŝargita sub certaj pH-kondiĉoj, ĝi estas konsiderita "malforta" specio. Tio estas grava karakterizaĵo por kompreni pri viaj analitoj ĉar ĝi determinos kian tipon de SPE-amaskomunikilaro uzi. Ĝenerale, pensi pri kontraŭoj kune helpos ĉi tie. Estas konsilinde parigi malfortan ion-interŝanĝan SPE-sorbentaĵon kun "forta" specio kaj fortan ion-interŝanĝan sorbaĵon kun "malforta" analito.