La apartigo kaj purigo de proteinoj estas vaste uzataj en biokemia esplorado kaj apliko kaj estas grava funkcia kapablo. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument kompilis la krudan disigon kaj fajnan disigon enhavon deproteinopurigo por ĉiuj. Tipa eŭkariota ĉelo povas enhavi milojn da malsamaj proteinoj, kelkaj estas tre riĉaj kaj kelkaj enhavas nur kelkajn kopiojn. Por studi certan proteinon, necesas unue purigi la proteinon de aliaj proteinoj kaj ne-proteinaj molekuloj.

Kruda disiĝo

Kiam la proteina ekstrakto (kelkfoje miksita kun nukleaj acidoj, polisakaridoj, ktp.) estas akirita, aro da taŭgaj metodoj estas elektita por apartigi la deziratan.proteinode aliaj malpuraĵoj. Ĝenerale, tiu paŝo de apartigo uzas metodojn kiel ekzemple saligo, izoelektra punkto-amasiĝo kaj organika solventa frakciigo. Ĉi tiuj metodoj estas karakterizitaj per simpleco kaj granda pretigkapablo, kiuj povas forigi multajn malpuraĵojn kaj koncentri la proteinan solvon. Iuj proteinaj ekstraktoj estas grandaj en volumeno kaj ne taŭgas por koncentriĝo per amasiĝo aŭ saligado. Vi povas elekti ultrafiltradon, ĝelan filtradon, frostan malplenan sekigon aŭ aliajn metodojn por koncentriĝo.

Bona disiĝo

Post la malglata frakciigo de la specimeno, la volumeno estas ĝenerale malgranda, kaj la plej multaj el la malpuraĵoj estis forigitaj. Por plia purigo, kromatografiometodoj ĝenerale inkludas ĝelfiltradon, ioninterŝanĝkromatografion, adsorbadkromatografion, kaj afineckromatografion. Se necese, vi ankaŭ povas elekti elektroforezon, inkluzive de zona elektroforezo, izoelektra punkto-aro, ktp. kiel la finan purigan procezon. La metodo uzita por subdividnivela apartigo estas ĝenerale malgranda en planado, sed kun alta rezolucio.

Kristaliĝo estas la fina procezo de proteina apartigo kaj purigo. Kvankam la kristaliĝoprocezo ne certigas, ke la proteino devas esti unuforma, ĝi estas nur kiam certa proteino havas avantaĝon en la solvo por formi kristalon. La kristaliĝoprocezo mem estas akompanata de certa grado da purigo, kaj rekristaliĝo povas forigi malgrandan kvanton da falsita proteino. Ekde denaturigiteproteinoneniam estis trovita dum la kristaliĝoprocezo, proteina kristaliĝo estas ne nur signo de pureco, sed ankaŭ potenca gvidlinio por determini, ke la produkto estas en sia natura stato.