Metodoj depurigado de proteinoj:

La metodo de purigado de proteino, apartigo kaj purigo de proteino, la proteino estas liberigita de la originaj ĉeloj aŭ histoj en solvita stato kaj restas en la origina natura stato sen perdo de biologia aktiveco. Tial, la materialo devus forigi bestan kaj grasan histon, la sema materialo eĉ devus senŝeligi la poluadon de la sema mantelo de substancoj kiel taninoj, kaj la oleosemo prefere uzu malalt-bolantan organikan solvilon.

1. La metodo de purigado de proteinoj, grandeco kaj malsamaj disiĝo-analizaj metodoj: dializo kaj ultrafiltrado uzas ĉi tiujn proteinojn por trapasi la naturon de molekuloj, kiuj ne povas trapasi la duonpenetreblan membranon; denseca gradienta centrifugado La kvalito kaj denseco de la proteino en la medio havos pli grandan efikon al partikloj. Sekiĝanta rapideco estas pli rapida; ĝela filtrado estas speco de kolumna kromatografio.

2. Apartigo de solvebla diferenco en uzo: elektro-precipitaĵo ĉar la neta ŝargo de proteinaj molekuloj estas ĉe nula izoelektra punkto, reduktante la elektrostatikan repuŝon inter molekuloj, facile kunigebla kaj minimuma solvebleco; salsolvaĵo uzata kun salsolvaĵo La koncentriĝo pliigas aŭ malpliigas la solveblecon de la proteino.

3. La ŝarĝo estas apartigita kaj analizita per malsamaj metodoj, la ĉefaj enhavoj inkluzivas elektroforezon kaj interŝanĝan kromatografion.

4. Metodoj depurigado de proteinojLa selektema adsorbado kaj apartigo de proteinoj utiligas la forton de partikla adsorbado.

5. Afineca kromatografio baziĝas sur disiĝo de Perantoj. Tiu biologia karakterizaĵo permesas al proteinmolekuloj ligi specife prefere ol kovalente al alia molekulo nomita Peranto.

6. Metodo de purigado de proteinoj: Metodo de precipitado de organika solvento de malalta temperaturo: Uzu organikajn solvilojn, kiuj estas mikseblaj kun akvo, kiel metanolo, etanolo, por redukti la solveblecon kaj precipitaĵon de plej multaj proteinoj. Ĉi tiu metodo estas pli alta ol la rezolucio elsalanta, sed la proteino malnaturas pli Kiam facile, ĝi devus esti farita ĉe malalta temperaturo.

Kiel purigipurigado de proteinoj:

Kiel purigi proteinon, proteino estas granda molekulo, kaj diversaj molekulaj grandecoj de albumino, ekzistas kelkaj pli simplaj metodoj por apartigi proteinon kaj malgrandajn molekulon materialojn, kaj ankaŭ apartigitan proteinan miksaĵon. La ĉefaj metodoj por apartigi proteinojn de malsamaj molekulaj grandecoj estas dializo, ultrafiltrado, ĝelfiltrado kaj centrifuga apartigo. Dializo kaj ultrafiltrado estas ofte uzitaj en proteinaj apartigmetodoj. La dializa miksaĵo por esti apartigita estas metita en dializsakon faritan el duonpenetrebla membrano, kaj tiam mergita en la dializsolvo por apartigo. Ultrafiltrado estas la procezo de preterpasado de akvo kaj aliaj malgrandaj molekuloj uzante centrifugan forton aŭ premon en duonpenetrebla membrano kaj kaptante proteinojn en la duonpenetrebla membrano. Tiuj du metodoj povas esti apartigitaj de protein-bazitaj makromolekuloj kaj neorganikaj sal-bazitaj malgrandaj molekuloj. Ili ofte estas salitaj eksteren, uzitaj lige kun la saldissolvmetodo, aŭ povas esti lanĉitaj por elpreni tiujn du metodojn post salado eksteren uzante neorganikajn salsolvojn.

1. Kiel purigi proteinon per saliga metodo: La bazo de salinga metodo estas, ke la solvebleco de proteino en diluita sala solvaĵo pliiĝos kun la pliiĝo de salokoncentriĝo, sed kiam la sala koncentriĝo pliiĝas al certa valoro, la akva aktiveco pliiĝos. Malkresko, kio siavice povas kaŭzi, ke iuj proteinoj generu ŝargojn tra la molekula struktursurfaco iom post iom neŭtraliĝi, kaj la hidratiga membrano estas iom post iom detruita, kio povas eventuale kaŭzi, ke rilataj proteinoj kaj molekuloj disvolvu aglomeraĵon kaj precipitiĝas el malsamaj solvoj.

2. Organika solva precipitaĵmetodo: Estas du kialoj por redukti la solveblecon de proteino en organikaj solviloj: kiel purigi proteinon kiel salo-solvo kun dehidratiĝo; due, la dielektrika konstanto de organikaj solviloj ol akvo povas esti reduktita En polusaj solviloj.

3. Proteina precipitanta agento: proteino kiel precipita agento nur agas sur unu tipo aŭ unu el proteina precipitaĵo, oftaj estas alkalaj, proteinoj, lektinaj kaj pezaj metaloj.

4. Polietilenglikola precipitaĵo: Kiel purigi hidrosolveblajn ne-jonajn polimerojn porpurigado de proteinoj, kiel ekzemple polietilenglikolo kaj natria dekstran sulfato por precipiti proteinojn.