Ποια είναι η μέθοδος καθαρισμού τουσύστημα καθαρισμού πρωτεϊνών? Είναι απαραίτητο να γνωρίζουμε την κωδικεύουσα αλληλουχία DNA της καθαρισμένης πρωτεΐνης, να δούμε ποια κύτταρα ή ιστοί υπερεκφράζονται στο γονίδιο στόχο και να σχεδιάσουμε εκκινητές γονιδίου για να ενισχύσουμε το arf του θραύσματος DNA στόχου. Αυτή είναι η λεγόμενη απόκτηση θραυσμάτων γονιδίου στόχου.

Κατασκευή φορέα έκφρασης: Στον προκαρυωτικό ή ευκαρυωτικό φορέα έκφρασης με τα χαρακτηριστικά της ίδιας της λαμβανόμενης γονιδιακής έκφρασης, το κύριο πρόβλημα αυτού του σταδίου είναι η κατασκευή του πλασμιδίου και του γονιδίου ενδιαφέροντος και του συστήματος έκφρασης. Ο χρόνος προκαρυωτικής έκφρασης είναι σύντομος, το κόστος είναι χαμηλό και η μεγάλη ποσότητα έκφρασης αποτελεί προτεραιότητα. το γονίδιο δεν εκφράζεται στο E. coli και το πρόβλημα εμφανίζεται στη βελτιστοποίηση κωδικονίων. Λαμβάνοντας υπόψη την καλύτερη δράση και τον καθαρισμό της πρωτεΐνης, οι ερευνητές επέλεξαν να εκφραστούν σε μαγιά Pichi. Η επιτυχής έκφραση της βελτιστοποίησης κωδικονίων είναι σημαντική.

Ποια είναι η μέθοδος καθαρισμού του συστήματος καθαρισμού πρωτεϊνών:

1. Κατακρήμνιση.

2. Ηλεκτροφόρηση: Μια φορτισμένη πρωτεΐνη είναι υψηλότερη ή χαμηλότερη από το ισοηλεκτρικό της σημείο και μπορεί να μετακινηθεί στο αρνητικό ηλεκτρόδιο ή στο θετικό ηλεκτρόδιο του ηλεκτρικού πεδίου στο ηλεκτρικό πεδίο. Υποστηρίξτε ηλεκτροφόρηση φιλμ, ηλεκτροφόρηση κ.λπ.

3. Αιμοκάθαρση: Μια μέθοδος που χρησιμοποιεί δύο σάκους αιμοκάθαρσης για να διαχωρίσει μεγάλα μόρια από πρωτεΐνες και μικρές μοριακές οργανικές ενώσεις.

4. Χρωματογραφία: Η ιοντοανταλλακτική χρωματογραφία χρησιμοποιεί τις ελεύθερες ιδιότητες των πρωτεϊνών. Κάτω από ένα συγκεκριμένο pH, τα φορτία και οι ιδιότητες των πρωτεϊνών είναι διαφορετικά και μπορούν να διαχωριστούν με ιοντοανταλλακτική χρωματογραφία. Στη χρωματογραφία ανταλλαγής ανιόντων, πρωτεΐνες με χαμηλή αρνητική ισχύ εκλούονται πρώτα. Μοριακά κόσκινα, γνωστά και ως διήθηση γέλης. Μικρές πρωτεΐνες εισέρχονται στους πόρους και παραμένουν σε αυτούς για μεγάλο χρονικό διάστημα. Οι μεγάλες πρωτεΐνες δεν μπορούν να εισέλθουν στους πόρους και να ρέουν έξω απευθείας.

5. Ποια είναι η μέθοδος καθαρισμού τουσύστημα καθαρισμού πρωτεϊνών? Υπερφυγοκέντρηση: Ο καθαρισμός πρωτεΐνης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό του μοριακού βάρους και μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως πρωτεΐνη. Ο σχηματισμός πρωτεϊνών με διαφορετικές πυκνότητες διαχωρίζεται.