Grobe Trennung und feine Trennung der Proteinreinigung

Die Trennung und Reinigung von Proteinen wird in der biochemischen Forschung und Anwendung häufig eingesetzt und ist eine wichtige betriebliche Fähigkeit. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument hat den Rohseparations- und Feinseparationsgehalt von zusammengestelltProteinReinigung für alle. Eine typische eukaryotische Zelle kann Tausende verschiedener Proteine ​​enthalten, einige sind sehr reichhaltig und andere enthalten nur wenige Kopien. Um ein bestimmtes Protein zu untersuchen, ist es zunächst notwendig, das Protein von anderen Proteinen und Nicht-Proteinmolekülen zu reinigen.

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Grobe Trennung

Wenn der Proteinextrakt (manchmal gemischt mit Nukleinsäuren, Polysacchariden usw.) erhalten wird, wird eine Reihe geeigneter Methoden ausgewählt, um das gewünschte abzutrennenProteinvon anderen Verunreinigungen. Im Allgemeinen werden bei diesem Trennungsschritt Methoden wie Aussalzen, Akkumulation am isoelektrischen Punkt und Fraktionierung organischer Lösungsmittel verwendet. Diese Methoden zeichnen sich durch Einfachheit und große Verarbeitungskapazität aus, wodurch viele Verunreinigungen entfernt und die Proteinlösung konzentriert werden können. Einige Proteinextrakte haben ein großes Volumen und eignen sich nicht für die Konzentration durch Anreicherung oder Aussalzen. Sie können zwischen Ultrafiltration, Gelfiltration, Gefriervakuumtrocknung oder anderen Methoden zur Konzentration wählen.

Feine Trennung

Nach der groben Fraktionierung der Probe ist das Volumen im Allgemeinen klein und die meisten Verunreinigungen wurden entfernt. Zur weiteren Reinigung umfassen Chromatographiemethoden im Allgemeinen Gelfiltration, Ionenaustauschchromatographie, Adsorptionschromatographie und Affinitätschromatographie. Bei Bedarf können Sie als abschließenden Reinigungsprozess auch Elektrophorese, einschließlich Zonenelektrophorese, isoelektrischer Punktsatz usw., wählen. Das zur Unterteilungsebenentrennung verwendete Verfahren ist im Allgemeinen klein in der Planung, aber mit hoher Auflösung.

Die Kristallisation ist der letzte Prozess der Proteintrennung und -reinigung. Obwohl der Kristallisationsprozess nicht sicherstellt, dass das Protein einheitlich sein muss, ist es nur dann möglich, wenn ein bestimmtes Protein in der Lösung einen Vorteil hat, um einen Kristall zu bilden. Der Kristallisationsprozess selbst geht mit einem gewissen Grad an Reinigung einher, und durch Umkristallisation kann eine kleine Menge an verfälschtem Protein entfernt werden. Da denaturiertProteinDa während des Kristallisationsprozesses noch nie ein Protein gefunden wurde, ist die Proteinkristallisation nicht nur ein Zeichen der Reinheit, sondern auch eine aussagekräftige Richtlinie, um festzustellen, ob sich das Produkt in seinem natürlichen Zustand befindet.


Zeitpunkt der Veröffentlichung: 19. November 2020