Hvad er rensemetoden forproteinoprensningssystem? Det er nødvendigt at kende den kodende DNA-sekvens for det oprensede protein, for at se hvilke celler eller væv der er overudtrykt i målgenet, og at designe genprimere til at amplificere arf af mål-DNA-fragmentet. Dette er den såkaldte erhvervelse af målgenfragmenter.

Konstruktion af ekspressionsvektor: I den prokaryote eller eukaryote ekspressionsvektor med egenskaberne for den opnåede genekspression i sig selv er hovedproblemet ved dette trin at konstruere plasmidet og genet af interesse og ekspressionssystemet. Den prokaryote ekspressionstid er kort, omkostningerne er lave, og en stor mængde ekspression er en prioritet; genet udtrykkes ikke i E. coli, og problemet opstår ved kodonoptimering. Af hensyn til bedre aktivitet og oprensning af proteinet valgte forskerne at udtrykke i Pichi-gær. Vellykket ekspression af kodonoptimering er vigtig.

Hvad er oprensningsmetoden for proteinoprensningssystemet:

1. Nedbør.

2. Elektroforese: Et ladet protein er højere eller lavere end dets isoelektriske punkt og kan flyttes til den negative elektrode eller den positive elektrode i det elektriske felt i det elektriske felt. Støttefilmelektroforese, elektroforese osv.

3. Dialyse: En metode, der bruger to dialyseposer til at adskille store molekyler fra proteiner og små molekylære organiske forbindelser.

4. Kromatografi: Ionbytterkromatografi bruger proteiners frie egenskaber. Under en specifik pH er proteinernes ladninger og egenskaber forskellige, og de kan adskilles ved ionbytterkromatografi. Ved anionbytterkromatografi elueres proteiner med lav negativ effekt først. Molekylsigter, også kendt som gelfiltrering. Små proteiner trænger ind i porerne og bliver i dem i lang tid. Store proteiner kan ikke trænge ind i porerne og flyde direkte ud.

5. Hvad er rensningsmetoden afproteinoprensningssystem? Ultracentrifugering: Proteinrensning kan bruges til at bestemme molekylvægten og kan bruges som protein. Dannelsen af ​​proteiner med forskellige tætheder adskilles.