Adskillelse og oprensning af proteiner er meget brugt i biokemisk forskning og anvendelse og er en vigtig operationel færdighed. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument har samlet indholdet af råseparation og finseparation afproteinrenselse for alle. En typisk eukaryot celle kan indeholde tusindvis af forskellige proteiner, nogle er meget rige og nogle kun indeholder få kopier. For at studere et bestemt protein er det nødvendigt først at rense proteinet fra andre proteiner og ikke-proteinmolekyler.

Grov adskillelse

Når proteinekstraktet (nogle gange blandet med nukleinsyrer, polysaccharider osv.) er opnået, vælges et sæt passende metoder til at adskille de ønskedeproteinfra andre urenheder. Generelt bruger dette separationstrin metoder såsom udsaltning, isoelektrisk punktakkumulering og organisk opløsningsmiddelfraktionering. Disse metoder er kendetegnet ved enkelhed og stor forarbejdningskapacitet, som kan fjerne mange urenheder og koncentrere proteinopløsningen. Nogle proteinekstrakter er store i volumen og er ikke egnede til koncentration ved ophobning eller udsaltning. Du kan vælge ultrafiltrering, gelfiltrering, frysevakuumtørring eller andre metoder til koncentration.

Fin adskillelse

Efter den grove fraktionering af prøven er volumenet generelt lille, og de fleste urenheder er blevet fjernet. Til yderligere oprensning omfatter kromatografimetoder generelt gelfiltrering, ionbytterkromatografi, adsorptionskromatografi og affinitetschromatografi. Hvis det er nødvendigt, kan du også vælge elektroforese, herunder zoneelektroforese, isoelektrisk punktsæt osv. som den afsluttende oprensningsproces. Metoden, der anvendes til opdelingsniveauadskillelse, er generelt lille i planlægningen, men med høj opløsning.

Krystallisation er den sidste proces af proteinadskillelse og oprensning. Selvom krystallisationsprocessen ikke sikrer, at proteinet skal være ensartet, er det kun, når et bestemt protein har en fordel i opløsningen til at danne en krystal. Selve krystallisationsprocessen ledsages af en vis grad af oprensning, og omkrystallisation kan fjerne en lille mængde forfalsket protein. Siden denatureretproteinaldrig er blevet fundet under krystallisationsprocessen, er proteinkrystallisering ikke kun et tegn på renhed, men også en stærk retningslinje til at fastslå, at produktet er i sin naturlige tilstand.