Metoder tilproteinoprensning:

Metoden til proteinoprensning, separation og oprensning af protein, proteinet frigives fra de oprindelige celler eller væv i en opløst tilstand og forbliver i den oprindelige naturlige tilstand uden tab af biologisk aktivitet. Af denne grund skal materialet fjerne dyre- og fedtvæv, frømaterialet skal endda skrælle forureningen af ​​frøskallen af ​​stoffer som tanniner, og oliefrøet skal helst bruge et lavtkogende organisk opløsningsmiddel.

1. Metoden til proteinoprensning, størrelse og forskellige separationsanalysemetoder: dialyse og ultrafiltrering bruger disse proteiner til at passere gennem naturen af ​​molekyler, der ikke kan passere gennem den semipermeable membran; tæthedsgradientcentrifugering Kvaliteten og densiteten af ​​proteinet i mediet vil have større indflydelse på partikler. Indstillingshastigheden er hurtigere; gelfiltrering er en slags søjlekromatografi.

2. Adskillelse af opløselighedsforskel i brug: elektroudfældning fordi nettoladningen af ​​proteinmolekyler er ved nul isoelektrisk punkt, hvilket reducerer den elektrostatiske frastødning mellem molekyler, let at aggregere og minimal opløselighed; saltopløsning brugt med saltopløsning Koncentrationen øger eller mindsker proteinets opløselighed.

3. Ladningen adskilles og analyseres ved forskellige metoder, hovedindholdet omfatter elektroforese og ionbytterkromatografi.

4. Metoder tilproteinoprensningDen selektive adsorption og separation af proteiner udnytter styrken af ​​partikeladsorption.

5. Affinitetskromatografi er baseret på adskillelse af ligander. Denne biologiske egenskab gør det muligt for proteinmolekyler at binde specifikt snarere end kovalent til et andet molekyle kaldet en ligand.

6. Metode til proteinrensning: Lavtemperatur organisk opløsningsmiddeludfældningsmetode: Brug organiske opløsningsmidler, der er blandbare med vand, såsom methanol, ethanol, for at reducere opløseligheden og udfældningen af ​​de fleste proteiner. Denne metode er højere end opløsningen ved at udsalte, men proteinet denaturerer mere Når det er let, bør det gøres ved lav temperatur.

Hvordan man renserproteinoprensning:

Hvordan man oprenser protein, protein er et stort molekyle, og forskellige molekylære størrelser af albumin, der er nogle enklere metoder til at adskille protein og små molekyle materialer, og også adskilt protein blanding. De vigtigste metoder til adskillelse af proteiner af forskellige molekylstørrelser er dialyse, ultrafiltrering, gelfiltrering og centrifugalseparation. Dialyse og ultrafiltrering er almindeligt anvendt i proteinseparationsmetoder. Den dialyseblanding, der skal adskilles, anbringes i en dialysepose lavet af en semipermeabel membran og nedsænkes derefter i dialyseopløsningen til adskillelse. Ultrafiltrering er processen med at passere vand og andre små molekyler ved hjælp af centrifugalkraft eller tryk i en semipermeabel membran og fange proteiner i den semipermeable membran. Disse to metoder kan adskilles fra proteinbaserede makromolekyler og uorganiske saltbaserede små molekyler. De udsaltes ofte, bruges i forbindelse med saltopløsningsmetoden, eller de kan introduceres for at fjerne disse to metoder efter udsaltning med uorganiske saltopløsninger.

1. Sådan oprenses protein ved udsaltning metode: Grundlaget for udsaltning metode er, at opløseligheden af ​​protein i fortyndet saltopløsning vil stige med stigningen i saltkoncentrationen, men når saltkoncentrationen stiger til en vis værdi, vandaktiviteten vil blive øget. Fald, hvilket igen kan få nogle proteiner til at generere ladninger gennem molekylstrukturens overflade for gradvist at blive neutraliseret, og hydreringsmembranen ødelægges gradvist, hvilket i sidste ende kan få beslægtede proteiner og molekyler til at udvikle agglomeration og udfældning fra forskellige opløsninger.

2. Udfældningsmetode med organisk opløsningsmiddel: Der er to grunde til at reducere opløseligheden af ​​protein i organiske opløsningsmidler: hvordan man oprenser protein som en saltopløsning med dehydrering; for det andet kan den dielektriske konstant for organiske opløsningsmidler end vand reduceres i polære opløsningsmidler.

3. Proteinudfældningsmiddel: protein som udfældningsmiddel virker kun på én eller én type proteinudfældning, almindelige er alkaliske, proteiner, lektiner og tungmetaller.

4. Polyethylenglycoludfældning: Sådan renses vandopløselige ikke-ioniske polymerer tilproteinoprensningsåsom polyethylenglycol og natriumdextransulfat for at udfælde proteiner.