Beth yw dull puro'r system puro protein

Beth yw dull puro ysystem puro protein? Mae angen gwybod dilyniant codio DNA y protein wedi'i buro, i weld pa gelloedd neu feinweoedd sy'n cael eu gorfynegi yn y genyn targed, a dylunio preimwyr genynnau i chwyddo arf y darn DNA targed. Dyma'r hyn a elwir yn caffael darnau genyn targed.

Adeiladu fector mynegiant: Yn y fector mynegiant procaryotig neu ewcaryotig gyda nodweddion y mynegiant genynnau a gafwyd ei hun, prif broblem y cam hwn yw adeiladu'r plasmid a'r genyn o ddiddordeb, a'r system fynegiant. Mae'r amser mynegiant procaryotig yn fyr, mae'r gost yn isel, ac mae llawer iawn o fynegiant yn flaenoriaeth; nid yw'r genyn yn cael ei fynegi yn E. coli, ac mae'r broblem yn digwydd yn optimeiddio codon. Wrth ystyried gwell gweithgaredd a phuro'r protein, dewisodd yr ymchwilwyr fynegi mewn burum Pichi. Mae mynegiant llwyddiannus o optimeiddio codon yn bwysig.

19

Beth yw dull puro'r system puro protein:

1. dyodiad.

2. Electrofforesis: Mae protein a godir yn uwch neu'n is na'i bwynt isoelectric a gellir ei symud i'r electrod negyddol neu electrod positif y maes trydan yn y maes trydan. Cefnogi electrofforesis ffilm, electrofforesis, ac ati.

3. Dialysis: Dull sy'n defnyddio dau fag dialysis i wahanu moleciwlau mawr o broteinau a chyfansoddion organig moleciwlaidd bach.

4. Cromatograffaeth: Mae cromatograffaeth cyfnewid ïon yn defnyddio priodweddau rhydd proteinau. O dan pH penodol, mae taliadau a phriodweddau proteinau yn wahanol, a gellir eu gwahanu gan gromatograffaeth cyfnewid ïon. Mewn cromatograffaeth cyfnewid anion, mae proteinau â phŵer negyddol isel yn cael eu hanwybyddu yn gyntaf. Rhidyllau moleciwlaidd, a elwir hefyd yn hidlo gel. Mae proteinau bach yn mynd i mewn i'r mandyllau ac yn aros ynddynt am amser hir. Ni all proteinau mawr fynd i mewn i'r mandyllau a llifo allan yn uniongyrchol.

5. Beth yw dull puro ysystem puro protein? Ultracentrifugation: Gellir defnyddio puro protein i bennu'r pwysau moleciwlaidd a gellir ei ddefnyddio fel y protein. Mae ffurfio proteinau â dwyseddau gwahanol yn cael ei wahanu.


Amser post: Ebrill-21-2021