Mae gwahanu a phuro proteinau yn cael ei ddefnyddio'n helaeth mewn ymchwil a chymhwyso biocemeg ac mae'n sgil gweithredol pwysig. System Puro Protein SCG Cwmni-Saipu Offeryn wedi llunio'r gwahanu crai a chynnwys gwahanu dirwy oproteinpuro i bawb. Gall cell ewcaryotig nodweddiadol gynnwys miloedd o wahanol broteinau, mae rhai yn gyfoethog iawn a rhai yn cynnwys ychydig gopïau yn unig. Er mwyn astudio protein penodol, yn gyntaf mae angen puro'r protein o broteinau eraill a moleciwlau nad ydynt yn brotein.

Gwahaniad bras

Pan geir y dyfyniad protein (weithiau'n gymysg ag asidau niwclëig, polysacaridau, ac ati), dewisir set o ddulliau priodol i wahanu'r hyn a ddymunir.proteino amhureddau eraill. Yn gyffredinol, mae'r cam hwn o wahanu yn defnyddio dulliau megis halltu, cronni pwyntiau isoelectric a ffracsiynu toddyddion organig. Nodweddir y dulliau hyn gan symlrwydd a gallu prosesu mawr, a all gael gwared ar lawer o amhureddau a chanolbwyntio'r datrysiad protein. Mae cyfaint rhai echdynion protein yn fawr ac nid ydynt yn addas i'w crynhoi trwy gronni neu halltu. Gallwch ddewis ultrafiltration, hidlo gel, rhewi sychu gwactod neu ddulliau eraill ar gyfer canolbwyntio.

Gwahaniad dirwy

Ar ôl ffracsiynu garw'r sampl, mae'r gyfaint yn fach yn gyffredinol, ac mae'r rhan fwyaf o'r amhureddau wedi'u dileu. Ar gyfer puro pellach, mae dulliau cromatograffaeth yn gyffredinol yn cynnwys hidlo gel, cromatograffaeth cyfnewid ïon, cromatograffaeth arsugniad, a chromatograffeg affinedd. Os oes angen, gallwch hefyd ddewis electrofforesis, gan gynnwys electrofforesis parth, set pwynt isoelectric, ac ati fel y broses puro derfynol. Mae'r dull a ddefnyddir ar gyfer gwahanu lefel isrannu yn gyffredinol yn fach o ran cynllunio, ond gyda datrysiad uchel.

Crisialu yw'r broses olaf o wahanu a phuro protein. Er nad yw'r broses grisialu yn sicrhau bod yn rhaid i'r protein fod yn unffurf, dim ond pan fydd gan brotein penodol fantais yn yr ateb i ffurfio grisial. Mae rhywfaint o buro yn cyd-fynd â'r broses grisialu ei hun, a gall ailgrisialu gael gwared ar ychydig bach o brotein difwyno. Ers dadnatureiddioproteinerioed wedi'i ganfod yn ystod y broses grisialu, mae crisialu protein nid yn unig yn arwydd o burdeb, ond hefyd yn ganllaw pwerus i benderfynu bod y cynnyrch yn ei gyflwr naturiol.