Rhennir asid niwclëig yn asid deocsiriboniwcleig (DNA) ac asid riboniwcleig (RNA), ymhlith y gellir rhannu RNA yn RNA ribosomaidd (rRNA), RNA negesydd (mRNA) a RNA trosglwyddo (tRNA) yn ôl gwahanol swyddogaethau.

Mae DNA wedi'i ganoli'n bennaf yn y cnewyllyn, mitocondria a chloroplastau, tra bod RNA yn cael ei ddosbarthu'n bennaf yn y cytoplasm.

Oherwydd bod gan fasau purin a seiliau pyrimidin fondiau dwbl cyfun mewn asidau niwclëig, mae gan asidau niwclëig nodweddion amsugno uwchfioled. Mae amsugniad uwchfioled halwynau sodiwm DNA tua 260nm, a mynegir ei amsugnedd fel A260, ac mae yn y cafn amsugno yn 230nm, felly gellir defnyddio sbectrosgopeg uwchfioled. Mae asidau niwcleig yn cael eu pennu'n feintiol ac yn ansoddol gan luminometer.

Mae asidau niwcleig yn amffolytes, sy'n cyfateb i polyasidau. Gellir daduno asidau niwcleig yn anionau trwy ddefnyddio byfferau niwtral neu alcalïaidd, a'u gosod mewn maes trydan i symud tuag at yr anod. Dyma egwyddor electrofforesis.

Egwyddorion a gofynion echdynnu a phuro asid niwclëig

1. Sicrhau cywirdeb strwythur sylfaenol asid niwclëig

2. Dileu halogiad moleciwlau eraill (megis eithrio ymyrraeth RNA wrth echdynnu DNA)

3. Ni ddylai fod unrhyw doddyddion organig a chrynodiadau uchel o ïonau metel sy'n atal ensymau mewn samplau asid niwclëig

4. Lleihau sylweddau macromoleciwlaidd fel proteinau, polysacaridau a lipidau gymaint â phosibl

Dull echdynnu a phuro asid niwcleig

1. Dull echdynnu ffenol/clorofform

Fe'i dyfeisiwyd ym 1956. Ar ôl trin y gell hylif wedi torri neu feinwe homogenate â ffenol / cloroform, mae'r cydrannau asid niwclëig, DNA yn bennaf, yn cael eu diddymu yn y cyfnod dyfrllyd, lipidau yn bennaf yn y cyfnod organig, ac mae proteinau wedi'u lleoli rhwng y ddau. cyfnodau.

2. Dyddodiad alcohol

Gall ethanol ddileu haen hydradiad asid niwclëig a datgelu'r grŵp ffosffad â gwefr negyddol, a gall ïonau â gwefr bositif fel NA﹢ gyfuno â'r grŵp ffosffad i ffurfio gwaddod.

3. Dull colofn cromatograffig

Trwy'r deunydd arsugniad arbennig sy'n seiliedig ar silica, gellir arsugniad DNA yn benodol, tra gall RNA a phrotein fynd trwodd yn esmwyth, ac yna defnyddio halen uchel a pH isel i rwymo asid niwclëig, ac eliwt â halen isel a pH uchel i wahanu a phuro cnewyllol. asid.

4. thermol cracio dull alcali

Mae echdynnu alcalïaidd yn bennaf yn defnyddio'r gwahaniaethau topolegol rhwng plasmidau crwn caeedig cofalent a chromatin llinol i'w gwahanu. O dan amodau alcalïaidd, mae proteinau dadnatureiddio yn hydawdd.

5. dull pyrolysis berwi

Mae'r hydoddiant DNA yn cael ei drin â gwres i fanteisio ar briodweddau moleciwlau DNA llinol i wahanu darnau DNA o'r gwaddod a ffurfiwyd gan broteinau dadnatureiddio a malurion cellog trwy allgyrchiant.

6. Dull gleiniau nanomagnetig

Gan ddefnyddio nanotechnoleg i wella ac addasu wyneb nanoronynnau superparamagnetig, paratoir gleiniau nano-magnetig silicon ocsid superparamagnetig. Gall y gleiniau magnetig adnabod yn benodol a rhwymo'n effeithlon i foleciwlau asid niwclëig ar ryngwyneb microsgopig. Gan ddefnyddio priodweddau superparamagnetig nanosfferau silica, o dan weithred halwynau Chaotropig (hydroclorid guanidine, isothiocyanate guanidine, ac ati) a maes magnetig allanol, cafodd DNA ac RNA eu hynysu o waed, meinwe anifeiliaid, bwyd, micro-organebau pathogenig a samplau eraill.