Dulliau opuro protein:

Y dull o puro protein, gwahanu a phuro protein, mae'r protein yn cael ei ryddhau o'r celloedd neu'r meinweoedd gwreiddiol mewn cyflwr toddedig ac yn parhau i fod yn y cyflwr naturiol gwreiddiol heb golli gweithgaredd biolegol. Am y rheswm hwn, dylai'r deunydd gael gwared ar feinwe anifeiliaid a gwenwyn, dylai'r deunydd hadau hyd yn oed ddileu halogiad y gôt hadau o sylweddau fel tannin, ac yn ddelfrydol dylai'r hadau olew ddefnyddio toddydd organig sy'n berwi'n isel.

1. Dull puro protein, maint a gwahanol ddulliau dadansoddi gwahanu: mae dialysis ac ultrafiltration yn defnyddio'r proteinau hyn i basio trwy natur moleciwlau na allant fynd trwy'r bilen lled-athraidd; centrifugation graddiant dwysedd Bydd ansawdd a dwysedd y protein yn y cyfrwng yn cael mwy o effaith ar ronynnau. Mae cyflymder setlo yn gyflymach; Mae hidlo gel yn fath o gromatograffeg colofn.

2. Gwahanu hydoddedd gwahaniaeth mewn defnydd: electro-dyodiad oherwydd bod tâl net moleciwlau protein ar bwynt isoelectric sero, gan leihau'r gwrthyriad electrostatig rhwng moleciwlau, yn hawdd i'w agregu, a hydoddedd lleiaf; hydoddiant halen a ddefnyddir gyda hydoddiant halen Mae'r crynodiad yn cynyddu neu'n lleihau hydoddedd y protein.

3. Mae'r tâl yn cael ei wahanu a'i ddadansoddi gan wahanol ddulliau, mae'r prif gynnwys yn cynnwys electrofforesis a chromatograffeg cyfnewid ïon.

4. Dulliau opuro proteinMae arsugniad dethol a gwahanu proteinau yn defnyddio cryfder arsugniad gronynnau.

5. Mae cromatograffaeth affinedd yn seiliedig ar wahanu ligandau. Mae'r nodwedd fiolegol hon yn caniatáu i foleciwlau protein rwymo'n benodol yn hytrach nag yn cofalent i foleciwl arall o'r enw ligand.

6. Dull puro protein: Dull dyddodiad toddyddion organig tymheredd isel: Defnyddiwch doddyddion organig sy'n gymysgadwy â dŵr, fel methanol, ethanol, i leihau hydoddedd a dyddodiad y rhan fwyaf o broteinau. Mae'r dull hwn yn uwch na'r datrysiad halltu allan, ond mae'r protein yn dadnatureiddio mwy Pan fydd yn hawdd, dylid ei wneud ar dymheredd isel.

Sut i buropuro protein:

Sut i buro protein, protein yn foleciwl mawr, a meintiau moleciwlaidd amrywiol o albwmin, mae rhai dulliau symlach i wahanu deunyddiau protein a moleciwl bach, a hefyd cymysgedd protein gwahanu. Y prif ddulliau ar gyfer gwahanu proteinau o wahanol feintiau moleciwlaidd yw dialysis, ultrafiltration, hidlo gel, a gwahanu allgyrchol. Defnyddir dialysis ac ultrafiltration yn gyffredin mewn dulliau gwahanu protein. Rhoddir y cymysgedd dialysis sydd i'w wahanu mewn bag dialysis wedi'i wneud o bilen semipermeable, ac yna'n cael ei drochi yn yr hydoddiant dialysis i'w wahanu. Ultrafiltration yw'r broses o basio dŵr a moleciwlau bach eraill gan ddefnyddio grym allgyrchol neu bwysau mewn pilen lled-athraidd a dal proteinau yn y bilen lled-athraidd. Gellir gwahanu'r ddau ddull hyn oddi wrth macromoleciwlau sy'n seiliedig ar brotein a moleciwlau bach anorganig sy'n seiliedig ar halen. Maent yn aml yn cael eu halltu, eu defnyddio ar y cyd â'r dull hydoddi halen, neu gellir eu cyflwyno i ddileu'r ddau ddull hyn ar ôl eu halltu gan ddefnyddio hydoddiannau halen anorganig.

1. Sut i buro protein trwy ddull halltu: Sail y dull halltu yw y bydd hydoddedd protein mewn hydoddiant halen gwanedig yn cynyddu gyda chynnydd crynodiad halen, ond pan fydd y crynodiad halen yn cynyddu i werth penodol, y bydd gweithgaredd dŵr yn cynyddu. Gostyngiad, a all yn ei dro achosi i rai proteinau gynhyrchu taliadau trwy arwyneb y strwythur moleciwlaidd i gael ei niwtraleiddio'n raddol, a chaiff y bilen hydradu ei ddinistrio'n raddol, a all yn y pen draw achosi proteinau a moleciwlau cysylltiedig i ddatblygu crynhoad a gwaddodiad o wahanol atebion.

2. Dull dyddodiad toddyddion organig: Mae dau reswm dros leihau hydoddedd protein mewn toddyddion organig: sut i buro protein fel hydoddiant halen gyda dadhydradu; yn ail, gellir lleihau'r cyson dielectrig o doddyddion organig na dŵr Mewn toddyddion pegynol.

3. Asiant gwaddodi protein: mae protein fel asiant gwaddodi yn gweithredu ar un math neu un o ddyddodiad protein yn unig, y rhai cyffredin yw alcalïaidd, protein, lectin, a metelau trwm.

4. Dyodiad glycol polyethylen: Sut i buro polymerau an-ïonig sy'n hydoddi mewn dŵr ar gyferpuro protein, fel polyethylen glycol a sodiwm dextran sylffad i waddodi proteinau.