Separace a čištění proteinů je široce používáno v biochemickém výzkumu a aplikacích a je důležitou provozní dovedností. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument sestavil obsah hrubé separace a jemné separaceproteinočista pro každého. Typická eukaryotická buňka může obsahovat tisíce různých proteinů, některé jsou velmi bohaté a některé obsahují jen několik kopií. Pro studium určitého proteinu je nutné protein nejprve očistit od jiných proteinů a nebílkovinných molekul.

Hrubá separace

Když se získá proteinový extrakt (někdy smíchaný s nukleovými kyselinami, polysacharidy atd.), vybere se soubor vhodných metod k oddělení požadovanýchproteinod jiných nečistot. Obecně tento krok separace používá metody, jako je vysolování, akumulace izoelektrického bodu a frakcionace organickým rozpouštědlem. Tyto metody se vyznačují jednoduchostí a velkou zpracovatelskou kapacitou, která dokáže odstranit mnoho nečistot a koncentrovat proteinový roztok. Některé proteinové extrakty mají velký objem a nejsou vhodné pro zahušťování akumulací nebo vysolováním. Pro zahuštění si můžete vybrat ultrafiltraci, gelovou filtraci, mrazicí vakuové sušení nebo jiné metody.

Jemné oddělení

Po hrubé frakcionaci vzorku je objem obecně malý a většina nečistot byla odstraněna. Pro další čištění chromatografické metody obecně zahrnují gelovou filtraci, iontoměničovou chromatografii, adsorpční chromatografii a afinitní chromatografii. V případě potřeby můžete jako konečný proces čištění zvolit také elektroforézu včetně zónové elektroforézy, nastavení izoelektrických bodů atd. Metoda použitá pro separaci na úrovni pododdělení je obecně malá při plánování, ale s vysokým rozlišením.

Krystalizace je konečný proces separace a čištění proteinů. Přestože proces krystalizace nezaručuje, že protein musí být jednotný, je to pouze tehdy, když určitý protein má v roztoku výhodu, že tvoří krystal. Samotný proces krystalizace je doprovázen určitým stupněm čištění a rekrystalizace může odstranit malé množství falšovaného proteinu. Od denaturaceproteinnebyl nikdy nalezen během procesu krystalizace, je krystalizace proteinu nejen známkou čistoty, ale také mocným vodítkem k určení, že produkt je ve svém přirozeném stavu.