Metody a purifikace purifikace proteinů

Metodyčištění bílkovin:

Metoda čištění proteinu, separace a čištění proteinu, protein se uvolňuje z původních buněk nebo tkání v rozpuštěném stavu a zůstává v původním přirozeném stavu bez ztráty biologické aktivity. Z tohoto důvodu by měl materiál odstraňovat živočišnou a tukovou tkáň, materiál semen by měl dokonce odlupovat kontaminaci obalu semen od látek, jako jsou taniny, a olejnaté semeno by mělo přednostně používat nízkovroucí organické rozpouštědlo.

1. Metoda čištění proteinů, velikost a různé metody separační analýzy: dialýza a ultrafiltrace využívají tyto proteiny k průchodu molekulami, které nemohou projít polopropustnou membránou; centrifugace s hustotním gradientem Kvalita a hustota proteinu v médiu bude mít větší vliv na částice. Rychlost usazování je rychlejší; gelová filtrace je druh kolonové chromatografie.

2. Oddělení rozdílu rozpustnosti při použití: elektroprecipitace, protože čistý náboj molekul proteinu je v nulovém izoelektrickém bodě, což snižuje elektrostatické odpuzování mezi molekulami, snadno se agreguje a má minimální rozpustnost; solný roztok použitý se solným roztokem Koncentrace zvyšuje nebo snižuje rozpustnost proteinu.

3. Náboj je separován a analyzován různými metodami, hlavní obsah zahrnuje elektroforézu a iontoměničovou chromatografii.

4. Metodyčištění bílkovinSelektivní adsorpce a separace proteinů využívá sílu adsorpce částic.

5. Afinitní chromatografie je založena na separaci ligandů. Tato biologická charakteristika umožňuje molekulám proteinu vázat se specificky spíše než kovalentně k jiné molekule zvané ligand.

6. Způsob čištění proteinů: Metoda srážení organickým rozpouštědlem při nízkých teplotách: Ke snížení rozpustnosti a srážení většiny proteinů používejte organická rozpouštědla, která jsou mísitelná s vodou, jako je methanol, ethanol. Tato metoda je vyšší než rozlišení vysolování, ale protein denaturuje více. Když je to snadné, mělo by to být provedeno při nízké teplotě.

6ca4b93f5

Jak se očistitčištění bílkovin:

Jak čistit protein, protein je velká molekula a různé molekulární velikosti albuminu, existuje několik jednodušších metod pro separaci materiálů proteinu a malých molekul a také separovaná proteinová směs. Hlavní metody pro separaci proteinů různých molekulových velikostí jsou dialýza, ultrafiltrace, gelová filtrace a odstředivá separace. V metodách separace proteinů se běžně používá dialýza a ultrafiltrace. Dialyzační směs, která má být separována, se umístí do dialyzačního vaku vyrobeného ze semipermeabilní membrány a poté se ponoří do dialyzačního roztoku pro separaci. Ultrafiltrace je proces průchodu vody a dalších malých molekul pomocí odstředivé síly nebo tlaku v semipermeabilní membráně a zachycování proteinů v polopropustné membráně. Tyto dvě metody lze oddělit od makromolekul na bázi proteinů a malých molekul na bázi anorganických solí. Často se vysolují, používají se ve spojení s metodou rozpouštění soli nebo mohou být zavedeny k odstranění těchto dvou metod po vysolení pomocí roztoků anorganických solí.

1. Jak čistit protein metodou vysolování: Základem metody vysolování je, že rozpustnost proteinu ve zředěném solném roztoku se bude zvyšovat s rostoucí koncentrací soli, ale když se koncentrace soli zvýší na určitou hodnotu, aktivita vody se zvýší. Snížení, které zase může způsobit, že některé proteiny generují náboje přes povrch molekulární struktury, který se postupně neutralizuje a hydratační membrána je postupně zničena, což může nakonec způsobit, že se příbuzné proteiny a molekuly vyvinou aglomeraci a vysrážejí se z různých roztoků.

2. Metoda srážení organickým rozpouštědlem: Existují dva důvody pro snížení rozpustnosti proteinu v organických rozpouštědlech: jak čistit protein jako solný roztok s dehydratací; za druhé, dielektrická konstanta organických rozpouštědel než vody může být snížena v polárních rozpouštědlech.

3. Protein precipitační činidlo: protein jako precipitační činidlo působí pouze na jeden nebo jeden typ proteinového srážení, běžné jsou alkalické, proteinové, lektinové a těžké kovy.

4. Srážení polyethylenglykolu: Jak čistit ve vodě rozpustné neiontové polymery pročištění bílkovinjako je polyethylenglykol a dextransulfát sodný k vysrážení proteinů.


Čas odeslání: 27. října 2020