L'acidu nucleicu hè divisu in l'acidu desossiribonucleicu (DNA) è l'acidu ribonucleicu (RNA), trà i quali l'RNA pò esse divisu in RNA ribosomi (rRNA), RNA messageru (mRNA) è RNA di trasferimentu (tRNA) secondu diverse funzioni.

L'ADN hè principarmenti cuncentratu in u nucleu, mitocondria è cloroplasti, mentri l'RNA hè principalmente distribuitu in u citoplasma.

Perchè e basi purine è basi di pirimidina anu cunjugatu doppiu ligami in l'acidi nucleici, l'acidi nucleici anu e caratteristiche di l'absorzione ultravioletta. L'absorzione ultravioletta di i sali di sodiu di DNA hè di circa 260 nm, è a so assorbanza hè espressa cum'è A260, è si trova à l'absorption à 230 nm, cusì a spettroscopia ultravioletta pò esse aduprata. L'acidi nucleichi sò determinati quantitativamente è qualitativamente da un luminometru.

L'acidi nucleichi sò anfoliti, chì sò equivalenti à poliacidi. L'acidi nucleichi ponu esse dissociati in anioni usendu tamponi neutri o alkalini, è posti in un campu elettricu per andà versu l'anodu. Questu hè u principiu di l'elettroforesi.

Principi e esigenze di estrazione di acidi nucleici è purificazione

1. Assicurà l'integrità di a struttura primaria di l'acidu nucleicu

2. Eliminate a contaminazione di altre molécule (cum'è escludendu l'interferenza di l'RNA quandu l'estrazione di DNA)

3. Ùn deve esse micca solventi urgànichi è cuncintrazioni elevate di ioni di metalli chì impediscenu l'enzimi in campioni di l'acidu nucleicu.

4. Reduce sustanzi macromoleculari cum'è proteini, polisaccaridi è lipidi quant'è pussibule

Metudu di estrazione di l'acidu nucleicu è purificazione

1. Metudu di estrazione di fenol / chloroform

Hè stata inventata in u 1956. Dopu avè trattatu u liquidu rottu di cellula o l'homogenatu di tissutu cù fenol / cloroformu, i cumpunenti di l'acidu nucleicu, principarmenti l'ADN, sò dissoluti in a fase aquosa, i lipidi sò principarmenti in a fase urgànica, è e proteine ​​​​si trovanu trà i dui. fasi.

2. Precipitazione di l'alcohol

L'etanolu pò eliminà a capa d'idratazione di l'acidu nucleicu è espone u gruppu di fosfati caricati negativamente, è ioni caricati positivamente cum'è NA﹢ ponu cumminà cù u gruppu fosfatatu per furmà un precipitatu.

3. Metudu di colonna cromatografica

Attraversu u materiale speciale di adsorption basatu in silice, l'ADN pò esse adsorbitu specificamente, mentre chì l'RNA è a proteina ponu passà in liscia, è dopu aduprà u sali altu è u pH bassu per ligà l'acidu nucleicu, è l'eluzione cù u sali bassu è u pH altu per separà è purificà nucleicu. acidu.

4. Thermal cracking alkali mètudu

L'estrazione alcalina usa principalmente e differenzi topologichi trà i plasmidi circulari chjusi covalenti è a cromatina lineare per separà. In cundizioni alkaline, i proteini denaturati sò solubili.

5. Metudu pirolisi bolle

A suluzione di DNA hè trattata termicamente per prufittà di e proprietà di e molécule di DNA lineari per separà i frammenti di DNA da u precipitatu furmatu da proteine ​​​​denaturate è debris cellulare per centrifugazione.

6. Metudu perle nanomagneticu

Utilizendu a nanotecnologia per migliurà è mudificà a superficia di nanoparticelle superparamagnetiche, sò preparati perle nanomagnetiche d'ossidu di siliciu superparamagneticu. E perle magnetiche ponu specificamente ricanuscià è ligà in modu efficace à e molécule d'acidu nucleicu nantu à una interfaccia microscòpica. Utilizendu e proprietà superparamagnetiche di nanosfere di silice, sottu à l'azzione di sali caotropici (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, etc.) è un campu magneticu esternu, l'ADN è l'RNA sò stati isolati da sangue, tissuti animali, alimenti, microorganismi patogeni è altri campioni.