I metudi dipurificazione di prutezione:

U metudu di purificazione di a proteina, a separazione è a purificazione di a proteina, a proteina hè liberata da e cellule originali o tissuti in un statu dissolutu è ferma in u statu naturali originale senza perdita di l'attività biologica. Per questa causa, u materiale deve eliminà u tissutu animali è adiposu, u materiale di sumente deve ancu sbuchjarà a contaminazione di u mantellu di sumente da sustanzi cum'è tannini, è l'oliu deve esse preferibilmente usà un solvente organicu bassu.

1. U metudu di purificazione di prutezione, taglia è metudi di analisi di separazione diffirenti: dialisi è ultrafiltrazione utilizanu sti proteini per passà a natura di e molécule chì ùn ponu micca passà per a membrana semi-permeable; centrifugazione di gradiente di densità A qualità è a densità di a proteina in u mediu avarà un impattu maiò in particeddi. A velocità di stabilimentu hè più veloce; A filtrazione di gel hè un tipu di cromatografia di colonna.

2. Separazione di a diffarenza di solubilità in usu: electro-precipitation perchè a carica netta di molécule di prutezione hè in u puntu isoelectric zero, riducendu a repulsion elettrostatica trà e molécule, faciule d'aggregate, è solubilità minima; suluzione salina usata cù suluzione salina A cuncentrazione aumenta o diminuite a solubilità di a proteina.

3. A carica hè siparata è analizata da diversi metudi, u cuntenutu principali include l'elettroforesi è a cromatografia di scambiu di ioni.

4. I metudi dipurificazione di prutezioneL'adsorzione selettiva è a separazione di e proteine ​​​​utilizanu a forza di l'adsorzione di particelle.

5. A cromatografia di affinità hè basatu annantu à a separazione di ligandi. Sta caratteristica biologica permette à e molécule di prutezione di ligà specificamente in quantu à covalente à una altra molécula chjamata ligand.

6. Metudu di purificazione di prutezione: Metudu di precipitazione di solventi organici à bassa temperatura: Aduprate solventi organici miscibili cù l'acqua, cum'è metanol, etanol, per riduce a solubilità è a precipitazione di a maiò parte di e proteine. Stu metudu hè più altu ch'è u risuluzione sali fora, ma a prutiìna denatures più Quandu faciuli, si deve esse fattu à bassu temperatura.

Cumu purificàpurificazione di prutezione:

Cumu purificà a proteina, a proteina hè una grande mulècula, è parechje dimensioni molecolari di l'albumina, ci sò parechji metudi più sèmplice per separà e proteine ​​​​è i materiali di molècula chjuca, è ancu a mistura di prutezione separata. I metudi principali per separà e proteine ​​​​di diverse dimensioni molecolari sò dialisi, ultrafiltrazione, filtrazione di gel è separazione centrifuga. A dialisi è l'ultrafiltrazione sò cumunimenti utilizati in i metudi di separazione di prutezione. A mistura di dialisi da esse separata hè posta in una borsa di dialisi fatta di una membrana semipermeable, è dopu immersa in a suluzione di dialisi per a separazione. L'ultrafiltrazione hè u prucessu di passà l'acqua è altre petite molécule chì utilizanu forza centrifuga o pressione in una membrana semi-permeable è intrappulà proteine ​​​​in a membrana semi-permeable. Sti dui metudi ponu esse siparati da macromolecule basate in proteini è molécule inorganiche basate in salitu. Sò spessu salati, aduprati in cunghjunzione cù u metudu di dissoluzione di u sali, o ponu esse introduttu per piglià sti dui metudi dopu a salatura cù suluzioni di sali inorganici.

1. Cumu purificà a proteina da u metudu di salting-out: A basa di u metudu di salting-out hè chì a solubilità di a proteina in a suluzione diluta di u sali aumenterà cù l'aumentu di a cuncentrazione di sali, ma quandu a cuncentrazione di sali aumenta à un certu valore, u l'attività di l'acqua serà aumentata. Diminuzione, chì à u turnu pò causà certi proteini à generà carichi attraversu a superficia di a struttura moleculare per esse gradualmente neutralizatu, è a membrana di idratazione hè gradualmente distrutta, chì pò eventualmente pruvucà proteine ​​​​è molécule relative à sviluppà agglomerazione è precipitate da diverse soluzioni.

2. Metudu di precipitazione di solventi organici: Ci hè dui motivi per riduce a solubilità di a proteina in solventi organici: cumu per purificà a proteina cum'è una suluzione di sali cù a desidratazione; in segundu, a constante dielettrica di solventi urgànichi chè l'acqua pò esse ridutta In solventi polari.

3. Agente di precipitazione di a proteina: a proteina cum'è un agentu di precipitazione agisce solu nantu à un tipu o unu di precipitazione di a proteina, i più cumuni sò alkaline, proteina, lectina è metalli pisanti.

4. Precipitazione di polyethylene glycol: Cumu purificà i polimeri non ionici solubili in acqua perpurificazione di prutezione, cum'è polyethylene glycol è sodium dextran sulfate per precipitate proteini.