Unsa ang paagi sa pagputli sasistema sa pagputli sa protina? Kinahanglan nga mahibal-an ang coding DNA sequence sa giputli nga protina, aron makita kung unsang mga selyula o tisyu ang sobra nga gipahayag sa target nga gene, ug sa pagdesinyo sa mga primer sa gene aron mapadako ang arf sa target nga tipik sa DNA. Kini ang gitawag nga pagkuha sa mga tipik sa target nga gene.
Pagtukod sa ekspresyon nga vector: Sa prokaryotic o eukaryotic expression vector nga adunay mga kinaiya sa nakuha nga ekspresyon sa gene mismo, ang nag-unang problema niini nga lakang mao ang pagtukod sa plasmid ug sa gene sa interes, ug ang sistema sa ekspresyon. Ang prokaryotic expression nga panahon mubo, ang gasto mao ang ubos, ug ang usa ka dako nga kantidad sa ekspresyon mao ang usa ka prayoridad; ang gene wala gipahayag sa E. coli, ug ang problema mahitabo sa codon optimization. Sa pagkonsiderar sa mas maayo nga kalihokan ug pagputli sa protina, gipili sa mga tigdukiduki nga ipahayag sa Pichi yeast. Ang malampuson nga pagpahayag sa pag-optimize sa codon hinungdanon.
Unsa ang pamaagi sa pagputli sa sistema sa pagputli sa protina:
1. Pag-ulan.
2. Electrophoresis: Ang usa ka gikarga nga protina mas taas o mas ubos kay sa isoelectric nga punto niini ug mahimong ibalhin ngadto sa negatibo nga electrode o ang positibo nga electrode sa electric field sa electric field. Pagsuporta sa film electrophoresis, electrophoresis, ug uban pa.
3. Dialysis: Usa ka pamaagi nga naggamit ug duha ka bag sa dialysis aron pagbulag sa dagkong molekula gikan sa mga protina ug gagmay nga molekular nga organikong compound.
4. Chromatography: Ion exchange chromatography naggamit sa libre nga mga kabtangan sa mga protina. Ubos sa usa ka piho nga pH, ang mga singil ug mga kabtangan sa mga protina managlahi, ug kini mahimong mabulag pinaagi sa ion exchange chromatography. Sa chromatography sa anion exchange, ang mga protina nga adunay ubos nga negatibo nga gahum ang una nga gikuha. Molecular sieves, nailhan usab nga gel filtration. Ang gagmay nga mga protina mosulod sa mga pores ug magpabilin niini sa dugay nga panahon. Ang dagkong mga protina dili makasulod sa mga pores ug direkta nga mogawas.
5. Unsa ang paagi sa pagputli sasistema sa pagputli sa protina? Ultracentrifugation: Ang pagputli sa protina mahimong gamiton aron mahibal-an ang gibug-aton sa molekula ug mahimong gamiton isip protina. Ang pagporma sa mga protina nga adunay lainlaing mga densidad gibulag.
Oras sa pag-post: Abr-21-2021